南京市戊型肝炎病毒感染的现况调查.pdfVIP

中文摘要 南京市戊型肝炎病毒感染的现况调查 研究生：邵家胜 导师：孟继鸿教授 东南大学医学院病原生物学与免疫学系 中文摘要 戊型肝炎病毒(hepatitisE％LrlJs，HEV)是一种新现病原微生物，最近才被国际病毒命名委 员会(ICTV)归入肝炎病毒科肝炎病毒属。在发展中国家，尤其是在热带和亚热带，腿V是引 起急性肝炎暴发流行的主要原因，并且大多是由于饮用被污染的水源所致。人群在感染HEV的 同时还可以与其他肝炎病毒发生合并或重叠感染，其中，在慢性I-IBV感染基础上重叠感染I-EV， 病情多加重，恢复缓慢，预后较差。孕妇感染I-IEV后病情表现更为严重，病死率可高达2004。 因此由HEV引起的戊型肝炎(HE)是一种严重危害人类健康的传染性疾病。 目前尚无HEV疫苗可对人群进行预防接种，对人群总体HEV感染率也缺乏明确的认识， 因此，了解全国及各个地区的HEV感染特征对研制和使用HEV疫苗进而达到预防和控制HEV 感染就显得十分重要和迫切。临床上诊断HEV感染主要依靠免疫学方法检测HEV抗体，由于 抗原抗体反应存在特异性，一种检测试剂质量的高低，关键取决于抗原的选择。刘崇柏等曾于 EIA诊断试剂现已被证实存在较大缺陷，所以结果的准确性受到影响，因此有必要采用新一代 的HEV检测试剂重新开展调查。本实验室的卢晶等经过研究和与现有市售试剂比较，证实以 HEV不同基因型和亚型p166混合抗原制备的HE免疫诊断试剂具有敏感性高、特异性强、适用 面广等特点，是一种可靠的HEV抗体检测试剂。 以往的研究表明南方抗-HEV流行率高于北方，其中一个重要原因是，HEV可以通过水源传 播。南京市地处长江流域，有丰富的水网分布，人口密集，具备HEV流行的基本条件，而且至 今尚无HEV感染状况的报道，因此有必要对南京市人群抗-HEV阳性率做一次大范围的筛查， 以期把握HEV的流行状况和流行趋势，为南京市HE的群策群防工作提供事实依据。 此外，由于HEV是RNA病毒，核酸复制缺乏校正系统。易于发生变异，基因型特别是基因 亚型随着时间的推移会出现新的变化，故存在基因型或基因亚型的多样性，而明确HEV的基因 型或亚型对于HE的诊断、预防及流行病学特征具有重要意义。众所周知，运用全基因序列进行 基因分型应是分型的金标准，因为它涵盖所有的遗传信息，但是实际操作起来费时费力，可行 性不高，所以我们迫切需要选择一段能够代表全基因信息的基因片段来用于HEV基因分型。世 5’ 界各地的实验室对HEV的基因分型提出了各自不同的区段，总数共达25个之多，其中ORF2 末端(nt5994-6294)，ORFl5’末端(ntl04-390)，ORF23’末端(nt6701-7018)最为常用。 本实验室的翟理杰等通过生物统计学分析，认为位于ORFI 代HEV基因组全序列进行基因分型，并建立了新的HEV基因分型标准。基于该前期工作，我们 运用此区段来进行南京市HEV基因型的鉴定。因此，本研究实验内容可分为以下两个部分； 东南大学硕士学位论文 l、南京市人群戊型肝炎病毒感染的血清学调查 2005年3—7月在南京市医院收集14020份血清标本，利用本室制备的多基因型混合抗原进行 HEV IgO抗体检测，同时进行个案调查以收集相关流行病学资料。调查结果显示抗一HEVlgG阳 性率为18．30％。男，女抗一HEV IgO阳性率分别为19．57％和16．84％，经标化后男性极显著高于女 异(P0．05)，而外来务工人员(23．95％)感染率则较高(P0．05)。 2、南京市戊型肝炎病毒基因型的鉴定 我们采用位于ORFl 反应体系做了摸索和探讨，通过3因素(dNTP、MgCl2、退火温度)8种不同水平的组合，结果显 mmol／L、1．5 mmol／L，退火温度为50℃时，为3种因素的最适组合。继后我们利用逆转录套式PCR (RT-nPCR)方法检测南京地区HEV