高活性纤维素分解菌株的筛选及其产酶条件的研究.pdfVIP

维普资讯 山西师范大学学报 (自然科学版) 第 16卷 第 3期 JournalofShanxiTeacherSUniversity VoI．16NO．3 2002年 9月 NaturaiScienceEdition Sep． 2002 文章编号 2C)02)03—0056—05 高活性纤维素分解菌株的筛选 及其产酶条件 的研究 张秀红 ， 张彩琴 ， 张云茹 (山西师范大学生命科学学院，山西 临汾 041004) 摘要：本实验采集了不同环境的2j种土样 ，用 以滤纸为唯一碳源的赫奇逊培养基进行纤维素 分解菌的初筛 ，发现香菜地 、韭菜地 、萱草地 、菠菜地里 的菌群能很好地分解纤维素 ，而且 以细 菌为主 ；再经 CMC—Na平板培养基复筛 ，结果菠菜地土样 中的混合菌溶解 圈最大最 明显 ，将 混合菌进行分离 ，并 对分离 出的细菌进行 产酶条件 的研 究 ，结果得 出，以pH 为 7．0，温度 45C条件 下 ，摇床培养大约 1Oh，酶活性最好． 关键词 ：纤维素 ；纤维素分解菌株 ；培养条件 中圈分类号 ：$93 335 文献标识码 ：A U 弓I舌 纤维素是 由葡萄糖 以 一1，4一糖苷键连接而成 的线状大分子物质 。是植物组织 的基本 成分 ，也是绿色植物光合作用的主要产物．它 的含量约 占植物总量 的一半 ，是地球上 既丰 富又能不断再生 的有机物质．但 目前除棉 、麻 、纸张和木材外 ，大物多数纤维素只作为废物 丢弃 ，而人和动物却无法直接消化．如果能将它转化成葡萄糖 ，它对人类 的贡献将是无法 估量 的．目前 ，利用高压酸水解 固然能实现 ，但此法需高温高压设备 ，不很经济．酶法分解 则提供 了一条捷径 ．在 自然界 中有大量微生物 ，它们能分泌各种纤维素酶 ，包括 C 酶 (内一一葡聚糖酶)、c 酶 (：外 ～葡聚糖酶)、一葡 萄糖苷酶．这三种酶己 由Woodetal提取 出 来 ，但它们单独存在 时降解纤维素 的能力较差 ，而同时存在 时表现 出很强 的活性一．本研 究从多种土样 中，选 出高活性纤维素分解菌株 ，并对其在不 同条件下培养 ，研究合适 的产 酶条件． 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 土样 菠菜地 、白菜地 、葱地 、萱草地 、韭菜地 、西红柿地 、胡萝 卜苗地 、苤蓝地 、小 收稿 日期 ：2002一O1—07 作者简介 ：张秀红 (1970 )，女，山西襄汾人 ，山西师范大学生命科学学院讲师 ，硕士 ，主要从事微生 物的教学与科研工作。 维普资讯 第 3期 张秀红 张彩琴 张云茹 ：高活性纤维素分解菌株 的筛选及其产酶条件 的研究 57 麦地 、玉米地 、油菜地 、生菜地 、芹菜地 、辣椒地 、池塘边 、杂草地 、柴禾堆处、大棚下 、露天草 地 、纺织厂车间灰尘 、整理厂 、造纸厂 、麦垛下 、秸杆 下等共 25处 ． 1．1．2 培养基 赫奇逊 固体培养基一 ：KH：PO 1．0g、MgSO ·7H!O 0．3g、NaC10．1g、 FeC130．01g、NaNO32．5g、水 1000mI、琼脂 20g、pH7．2～7．4． 赫奇逊液体培养基 ：成分与 固体赫奇逊培养基相 同，不加琼脂． 羧 甲基纤维素钠 ：CMCNa20g、NaHPO 2．5g、KH2PO 1．5g、蛋 白胨 2．5g、酵母膏 0．5g、水 1000mL、琼脂 20g、pH7．0～7．2． 牛 肉膏蛋白胨培养基 ：牛肉膏 3g、蛋 白胨 10g、琼脂 1jg、水 1000mI、pH7．O～7．2． 1．1．3 实验器材 高压灭菌锅 、恒温培养箱 、显微镜 、滤纸等． 1．2 方 法 1．2．1 初筛 (1)滤纸 的处理 ：将 大块滤纸剪成直径近 于培养皿大小 的圆形 ，用 1 的醋 酸浸泡一昼夜 除去淀粉 ，用碘液检验 ，再用 2％NaHCO。洗至 中性 ，晾干待