分子生物学2.2.ppt

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分子生物学2.2概要1

通常情况下,DNA的二级结构分两大类: 右手螺旋 左手螺旋 DNA双链的变性和复性 P40 P40---10: 什么是DNA的Tm值?它受哪些因素的影响? Tm值是DNA的解链温度或称熔点,当DNA溶液温度升高到接近水的沸点时,260nm的吸光度明显增加,这种现象称为增色效应,科学家把吸光度增加到最大值一半时的温度称为DNA的解链温度或熔点(melting temperature/point),用Tm表示。 影响Tm的因素: DNA中G+C的含量 溶液中的离子强度 DNA的均一性 两个等长的DNA片段,一个GC含量为70%,一个GC含量为30%,哪个Tm值高?为什么? DNA的Tm与下列因素有关 DNA的均一性:均质DNA的熔解过程发生在一个较小的温度范围内,异质DNA熔解过程发生在一个较宽的温度范围内。 GC含量:在pH7.0,0.165mol/L的NaCl中,DNA的Tm值与GC含量之间成正比关系,GC含量越高,Tm值越高,因为含GC对多的DNA分子更稳定。 介质中的离子强度:一般情况,离子强度较低的介质中,DNA的熔解温度较低,而且熔解温度范围较宽。而在高离子强度时,DNA的Tm值较高,且熔解发生在一个较小的温度范围内。 以下DNA(只写出一条链的序列)中,解链温度最高的是: A.TTCAAGAGACTT B.TCACAGTACGTC C.GGACCTCTCAGG D.CGTAGAGAGTCC 以下DNA(只写出一条链的序列)中,解链温度最高的是: A.TTCAAGAGACTT (4个GC对) B.TCACAGTACGTC (6个GC对) C.GGACCTCTCAGG (8个GC对) D.CGTAGAGAGTCC (7个GC对) * P32/36 一个核苷酸的5′位磷酸与下一位核苷酸的3′-OH形成3′,5′磷酸二酯键,构成不分支的线性大分子,其中磷酸基和戊糖基构成DNA链的骨架,可变部分是碱基排列顺序。 核苷酸之间的连接方式 默认书写顺序5‘→3’ 连 接 A T G C A T G C P37 P35/38 A B Z 大沟宽 小沟窄 小沟窄 大沟变深 小沟宽深 大沟不存在 小沟窄而深 A B Z Handedness Base Inclination * * *

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