气相色谱-质谱法测定大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸含量.pdfVIP

第43卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第8期 of 2015年8月 ChineseJournal 1187～1192 AnalyticalChemistry 气相色谱-质谱法测定大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸含量 王菁1 田盛兰1孙伟红2林洪1 李振兴“ 1(中国海洋大学食品科学与工程学院，青岛266003)2(中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071) 摘要建立了大菱鲆肌肉中羧甲基赖氨酸(CML)的气相色谱．质谱(GC．MS)检测方法。以大菱鲆为研究对 象，选用三氯甲彬丙酮对样品进行脱脂，经硼氢化钠还原、蛋白水解、净化、衍生化(酯化与酰化)后，进行 GC-MS选择离子监测(SIM)模式检测。选取m／z392为定量离子，m／z392，365，333，305为定性离子。结果 表明，CML三氟乙酰甲酯化衍生物峰面积与浓度在1—200彬L范围内呈良好线性关系，方法检出限为 I mg／kg，定量限为5mekg，3个加标水平(10，150和350ms／kg)下的平均回收率在100％～104％之间，相 对标准偏差RSD5％(n=5)。 关键词羧甲基赖氨酸；大菱鲆；气相色谱．质谱；衍生化 1 引 言 晚期糖基化终末产物(Advancedglycation 要标志性产物【2J。研究表明，食品中AGEs与心脑血管疾病、肾脏疾病、糖尿病及其并发症等慢性疾病 有密切关系∞，4J。为更好地监测其在食品中含量，建立灵敏可靠的检测方法非常必要。 目前，关于食品中CML检测方法有酶联免疫法(ELISA)¨’5J、高效液相色谱法(HPLC)M胡J、液相色 结果偏差较大；LC．MS具有良好的灵敏度，又避免了衍生化处理，但基质干扰带来的离子抑制效应难以 避免，且检测成本昂贵¨1|。GC—MS具有高灵敏度、高选择性的优势，有望开发成有效的CML检测方法。 产品中的CML，但未检测到鲑鱼中的CML。目前，尚未见水产品中CML确证检测方法的报道。本研究 以海水鱼中重要养殖品种大菱鲆为研究对象，利用GC-MS测定鱼肉中CML含量，定量限由 150¨g／L【121降到5¨g／L，为水产品中CML检测提供了技术参考。 2 实验方法 2．1仪器、试剂与材料 6890N／5973I气相色谱／质谱联用仪(美国Agilent公司)，单四极杆，配有EI源。 酐(色谱纯，纯度99％，北京百灵威科技有限公司)；氯化亚砜(色谱纯，纯度≥99．5％，天津科密欧试剂 公司)；甲醇(色谱纯，美国TEDIA公司)；其它试剂均为国产分析纯。 大菱鲆购自青岛南山水产市场，经“三去”处理后，取背部肌肉绞碎，分装后，置于一18。C保存备用。 2．2溶液配制 准确称取10．00CML于10．00mL超纯水，混匀，制成1 mg mg／mL标准贮备溶液，分装后，于一18。C 保存备用。 mol／L mol／L mol／L 配制6 HCl、0．2 9．2)、2 NaBH。(溶于0．1NaOH)；取 mol／L硼酸盐缓冲液(pH 2015-05-07收稿；2015-06-18接受 本文系现代农业产业技术体系建设专项资金资助(No．CARS60) ·E—mail：lizhenxing@ORe．edu．en 1188 分析化学 第43卷 1．46 mL氯化亚砜缓慢加人100mL甲醇中，制成衍生剂备用。 2．3样品前处理 r／min mL脱脂液，混匀，于4。C以4000 2．3．1脱脂准确称取2