实验常用试剂、缓冲液的配制方法.doc

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 1、1M Tris-HCl??????????? □组份浓度 1 M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0）???□配制量 1L ????□配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 ?????????????????????????2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。?????????????????????????3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 ??????????????????????????????????????????????????????? pH值????????????????????? 浓HCl?????????????????????????????????????????????????????????7.4??????????????????????? ?约70mL ??????????????????????????????????????????????????????? 7.6??????????????????????? ?约60mL ??????????????????????????????????????????????????????? 8.0???????????????????????? 约42mL ??????????????????????? 4. 将溶解定容至1L。????????????????????????5. 高温高压灭菌后，室温保存。???????????????????????????注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1，溶液的pH值大约降低0.03个单位。?2、1.5 M Tris-HCl????□组份浓度 1.5 M Tris-HCl ??? （pH8.8）??????????? □配制量 1L ????????□配置方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 ?????????????????????????? 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 ?????????????????????????? 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 ????????????????????????????4. 将溶液定容至1L。 ???????????????????????? 5. 高温高压灭菌后，室温保存。??????? 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1，溶液的pH值大约降低0.03个单位。?3、10×TE Buffer??????? □组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0） ?□配制量 1L ?□配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。 ??????????????????????????????1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL ???????????????????????????? 500 mM EDTA（pH8.0） 20mL ??????????????????????2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。 ???????????????????? 3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。 ???????????????????? 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠?????□组份浓度 3 M 醋酸钠 ??? （pH5.2）??????????□配制量 100mL ??? □配置方法 1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 ??????????????????????????2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 ?????????????????????? 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 ?????????????????????????4. 高温高压灭菌后，室温保存。 5、PBS Buffer????????? □组份浓度 137 mM NaCl，2.7mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 ??????????????????????????????? □配制量 1L □配置方法 1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中。 ????????????????????????????????????????????????????? NaCl???????? ?????????