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- 2017-07-06 发布于河南
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核酸制备方案
核酸制备方案 制作人:顾恒 一、理化性质 二、制备原则 三、提取过程 四、实验步骤 五、注意事项 六、常见问题 一、核酸的理化性质 1、DNA是为白色类似石棉样的纤维状物 RNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶 二、制备原则 1、分离纯化的总原则 ①应保证核酸一级结构的完整性; ②排除其它分子的污染。 2、纯化达到的要求 ①不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子; ②其它生物大分子的污染应降低到最低程度; ③排除其它核酸分子的污染。 三、提取过程 材料准备 破碎细胞或包膜(释放内容物) 核酸分离纯化 沉淀或吸附核酸,并去除杂质 核酸溶解在适量缓冲液或水中 四、实验步骤 (一)、选择材料 DNA的来源:小牛胸腺?动物肝脏?鱼类精子,植物种子的胚。 RNA的来源:新鲜组织或细胞。 (二)、破碎细胞 ①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法; ②化学试剂法:用SDS处理细胞;
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