绪论植物组织培养试卷.ppt

致癌农杆菌介导的Ti质粒载体转化法 2、重组DNA的直接转化法 微粒散射技术 (Particle bombardment) （二）基因工程的基本步骤 1、目的基因的克隆与鉴定； 2、植物表达载体的构建； 3、植物的遗传转化； 4、转化细胞的筛选； 5、转基因植株的鉴定。 基因 基因克隆 基因转化 DNA重组技术 植物遗传转化技术 植物组织培养技术 抗病细胞突变体基本原理 抗病细胞突变体筛选程序 抗病细胞突变体筛选实例 六、植物抗病细胞突变体筛选 基本原理 利用植物组织培养过程中出现的变异，或由物理、化学因素诱发变异，给予一定的选择压力，筛选出符合育种目标的无性系。 基本程序 选择压力 选择突变体 分离突变体 鉴定突变体 愈伤组织 细胞 原生质体 保持和利用突变体 愈伤组织：最简单的细胞材料，缺点多，普遍采用。 细胞培养物： 由少数细胞集合而成，可弥补愈伤组织的不足。 原生质体：最理想的细胞材料，但分离和培养技术不完善，不能普遍采用。 材料选择 负选择法：选择一种培养基，使得突变细胞不能生长，野生型细胞生长。然后加负选择剂，可杀死野生型分裂细胞，保留生长的突变细胞。 正选择法： 将细胞置于有害或有毒的培养基中，能生长的为突变细胞。 突变体的分离 突变体的4个特征： 突变体以低频率发生 离开选择压，突变体稳定 植株再生后，突变细胞系稳定，从再生植株发