兴国红鲤ER基因克隆表达及EE2暴露对肝中ER表达的影响.pdf

第 41 卷 第 1 期 水 生 生 物 学 报 Vol. 41 , No . 1 2 0 1 7 年 1 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA J a n . , 2 0 1 7 doi: 10.7541/2017.4 兴国红鲤ER基因克隆表达及EE2暴露对肝中ER表达的影响 1, 2 1, 2 1 1 1 1 1 宋明月 单喜双 陈细华 岳华梅 叶 欢 杨晓鸽 李创举 (1. 中国水产科学研究院长江水产研究所, 农业部淡水生物多样性保护重点实验室, 武汉 430223; 2. 上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306) 摘要: 为评估环境内分泌干扰物对鱼类的影响, 研究克隆了兴国红鲤雌激素受体(Estrogen receptor, ER)4种亚 型ERα 、ERβ 、ERβ 1、ERβ2 的全长cDNA序列, 氨基酸序列比对发现兴国红鲤ERs分别与3种鲤科鱼类相应亚 型具有较高的同源性。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测结果表明, 4种ER亚型mRNA在雌雄成体组织中呈 现差异表达, 雌性个体中, 肝、卵巢和肠中4种ERs 的表达量均较高; 在雄性个体中, ERα和ERβ 主要在肝中表 达, ERβ 1、ERβ 2 分别在肠和精巢中的表达量最高。将150 日龄的兴国红鲤幼鱼分别暴露在0.01 、0.1和 1 nmol/L的17α-乙炔基雌二醇(EE2) 中4周, 检测了雌性幼鱼肝中4种ER基因的表达变化情况。在EE2 中暴露 1—2周后, 兴国红鲤雌性幼鱼肝中ERα基因的表达水平有极显著的提升; 各浓度 EE2 能持续显著促进其肝中 ERβ 的表达; 在1—2周内各浓度EE2对 ERβ 1表达有所抑制; 第1周EE2能够抑制ERβ2基因mRNA 的表达, 并在 0.01 nmol/L时抑制作用达到了显著的水平。上述研究结果表明, EE2暴露能诱导或抑制兴国红鲤雌性幼鱼肝 中ER亚型的表达, 相对于ERβ 、ERβ 1和ERβ2 、ERα可作为EE2短期(1—2周)敏感性生物学标记。 关键词: 雌激素受体; 兴国红鲤; EE2; 实时荧光定量PCR + 中图分类号: Q344 .1 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2017)01-0026-07 雌激素主要通过雌激素受体(ER)发挥生理作 115 ng/L不等; 水体中的EE2进入生物有机体能够 [1] 用 , ER属于核受体超家族(Nuclear receptor super 模仿机体内源雌激素与ER结合或与机体内源雌激 [2] family)成员 。ER参与的雌激素信号转导通路主 素竞争ER分子, 干扰机体正常的内分泌系统。研 [3] 要有两种 : 一种是基因组水平的调控, 包括依赖雌 究表明, E