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贵州省布鲁氏菌血清学监测及其分子特征研究

贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 贵州省布鲁氏菌血清学监测及其分子特征研究 研究生 王 月 导师 左丽 教授 摘要 目的:了解贵州省人间和动物间布鲁氏菌感染状况,分析病原体特征,从分子水 平阐述患者和动物来源菌株间的相互关系,揭示潜在的传染源,为贵州省布鲁氏 菌病的预防和控制提供病原学依据。 方法:按照全国人间布鲁氏菌病监测方案,采集贵州省2010~2013 年3 月布鲁 氏菌病监测及疫情处置血清标本,采用虎红平板凝集试验(RBPT )及试管凝集 试验(SAT)定性和定量检测布鲁氏菌抗体;对布病可疑患者和患病动物全血采 用血培养法分离布鲁氏菌,采用传统方法和PCR 方法鉴定布鲁氏菌的种型,应 用脉冲场凝胶电泳(PFGE )分析菌株的分子多态性。 结果:血清学监测结果显示,2010~2013 年共检测血清标本 898 份,其中人血 清754 份,布病抗体阳性72 份,阳性率9.55% ;狗血清55 份,布病抗体阳性3 份,阳性率 5.45% ;羊血清 31 份,布病抗体阳性 10 份,阳性率 32.26% ;猪血 清58 份,布病抗体阴性。细菌分离结果显示,2010~2013 年间共检测标本 153 份,其中人全血标本 139 份,检出布鲁氏菌株8 株,检出率5.76% 。动物全血标 本11 份,检出布鲁氏菌株4 株,检出率36.36% 。病羊内脏3 份,未检出布鲁氏 菌株。传统方法和PCR 方法检测结果显示12株菌株均为羊种3 型布鲁氏菌;PFGE 分析显示,羊和患者来源菌株经Xba1 酶切产生10-20 条清晰条带,其PFGE 带 型高度相似。 结论: 1. 人、羊、犬血清抗体阳性及分离出的布鲁氏菌株提示贵州省人、羊和犬均有 布鲁氏菌感染的情况存在 。 2. PCR 、PFGE 分析显示人、羊来源菌株PFGE 带型高度相互关系,提示羊可能 为贵州省布鲁氏菌的主要传染源。 2 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 关键词:贵州省 布鲁氏菌 布鲁氏菌抗体 PCR PFGE 3 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 前 言 布鲁氏菌病 (Brucellosis ,简称布病)是由布鲁氏菌属 (Brucella )的细菌侵 入机体,引起的人兽共患的传染-变态反应性疾病,是《中华人民共和国传染病 [1] 防治法》规定报告的乙类传染病 。布鲁氏菌是革兰氏阴性胞内寄生菌,能感染 许多种动物和人。目前,根据致病性及宿主的不同将布鲁氏菌分成6 个种,即牛 种布鲁氏菌(B. abortus )、犬种布鲁氏菌(B. cannis )、羊种布鲁氏菌(B. melitensis )、 沙林鼠种布鲁氏菌(B. neotomac )、绵羊附睾种布鲁氏菌(B. ovis )和猪种布鲁 氏菌(B. suis )。布病在家畜中牛、羊、猪最常发病,且可以由牛、羊、猪传染 给人和其他家畜。该病在世界范围内广泛流行,在世界上200 多个国家和地区中 [2] 报告有人、畜布病疫情的约有 170 个,人间发病率波动范围较大 。我国也是布 病的高发国家,新疆、青海、西藏、内蒙古等地区尤为严重,发病率已超过1/10 [3] 万 。布病造成的危害是双重的,即影响人的身体健康,又影响畜牧业发展,造 [4] 成严重的经济损失 。 贵州省畜

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