气相色谱方法开发步.ppt

GC 气相色谱方法建立 气相色谱方法开发步骤 样品处理 (1)气体样品(可直接进样分析) (2)固体样品 (3)液体样品 固体样品 分析固体样品中的挥发性组分 顶空进样 吹扫-捕集 热萃取(热解吸) 分析部分组分(转化成液体) 固液萃取： 蒸馏 索氏提取 超声波萃取 快速溶剂萃取 微波萃取 超临界流体萃取 样品全分析-----转化成液体样品 消化 有机溶剂溶解 水溶解 液体样品 分析部分组分 固相萃取 液液萃取 柱层析 是否满足进样要求 （1）浓度太高:用溶剂稀释或减小进样量 （2）浓度太低:浓缩样品或增加分析技术的进样体积 （3）样品热稳定性差：衍生化处理（柱前衍生、柱内衍生、柱后衍生）;将样品冷冻处理 （4）高分子化合物的分离： 体积排阻色谱、透析、超滤、沉淀、膜分离 （5）固体颗粒： 过滤、沉淀、离心 气载颗粒物中PAHs的测定 蔬菜水果中的农残分析 谷类中农残分析 水中醛的分析 血液中乙醇含量的测定（静态顶空） 乙醇储备液：10g/L 内标溶液储备液：1.0%正丙醇，使用时稀释到0.25% 标准溶液：将乙醇储备液稀释10倍，然后取该溶液（1g/L）1ml置于10ml顶空瓶中，同时加入1ml内标溶液，迅速密封。用于测定校正因子。 血样：取1ml充分混合均匀的血液样品于10ml顶空瓶中，同时加入1ml内标溶液，迅速密封。 注意顶空条件： 平衡温度：50℃ 平衡时间：10min 加压：13.8KPa 压力平衡时间：0.15min 进样时间：0.15min 工作场所中微量腈化物的热解吸分析 取样的捕集管：取150mm×3mm的U形不锈钢管，分别用10%NaOH和盐酸（1：1）溶液处理，用蒸馏水冲洗到中性，再用甲醇冲洗5次，用氮气吹干。用丙酮将chromosorb102浸泡0.5h，过滤后用丙酮冲洗3次，待丙酮挥发干后，装入不锈钢管，两端用玻璃毛塞好。这就是用于取样的捕集管。 活化：将捕集管在240℃下通氮气（30ml/min）活化10h。 取样：把捕集管接到流量经校正的真空泵上取样，待设定体积的空气通过捕集管后，取下捕集管，密封冷藏。 GC分析：将捕集管与GC的热解吸装置中，与240℃解吸进样。 确定仪器配置 色谱柱 进样器的选择 检测器 载气 色谱柱的选择 GC常用色谱柱有填充柱和毛细管柱。 填充柱是常用的GC色谱柱，其分离性能和分析速度都比毛细管差，但制备简单。 填充柱种类：气固色谱填充柱和气液色谱填充柱。 进样方法选择 色谱分离要求在最短的时间内，以“塞子”形式打进一定量的试样，进样方法可分为：１、气体试样：大致进样方法有四种：（１）注射器进样，（２）量管进样，（３）定体积进样，（４）气体自动进样。一般常用注射器进样及气体自动进样。注射器进样的优点是使用灵活，方法简便，但进样量重复性较差。气体自动进样是用定量阀进样，重复性好，且可自动操作。 ２、液体试样：一般用微量注射器进样，方法简便，进样迅速。也可采用定量自动进样，此法进行重复性良好。３、固体试样：通常用溶剂将试样溶解，然后采用和液体进样同样方法进样。也有用固体进样器进样的。 检测器选择 依据分析对象和目的来确定。（参考前面所讲检测器原理选择） 载气选择 作为气相色谱载气的气体，要求要化学稳定性好；纯度高；价格便宜并易取得；能适合于所用的检测器。常用的载气有氢气、氮气、氩气、氦气、二氧化碳气等等。 尝试分离确定初始条件 主要包括：进样量，检测温度，进样温度，色谱柱温和载气流速。 分离条件优化 分离条件的优化目的： 在最短的分离时间内达到符合要求的分离结果。（分析时间、分离度） 主要包括三方面的参数优化： 更换色谱柱（选择性） 改变色谱柱温（分离度） 载气流速。（分离度） 定性分析 定性分析：定性分析是GC的弱项，一般有以下几种方法 1.利用已知物对照定性。（使用得较为广泛） 2.利用文献保留数据定性。（需要有大量的文献资料库） 3.利用化学反应定性。（比较麻烦，一般要进行样品的前处理） 4.利用其它仪器分析结合定性。（需配备多种仪器，投资大，运行成本高） 5.利用检测器定性。（最简便易行，但定性的范围较窄） 定量分析 定量分析：定量分析是GC的强项，一般采用以下三种方法： 峰面积归一法 内标法 外标法 峰面积归一法 把所有组分的含量之和按100%计算，当样品中所有的均能流出色谱柱，并在检测器上都能产生信号。 Wi=fi’Ai/∑ fi’Ai×100% 如果被分析样品的组份是同系物，校正因子相近可直接用 峰面积求出组份的百分含量。如果被分析样品的组份不是同系物，则要知道每种组份的相对校正因子。优点：不必准确知道进样量，操作条件略为变动对结果影响较小，计算