化学发光成像分析法检测健康食品中的褪黑激素.pdfVIP

第26卷 第4期 延安大学学报(自然科学版) Vo1．26 No．4 2007年12月 Journal of Yanan University(Natural Science Edition Dee．20o7 化学发光成像分析法检测健康食品中的褪黑激素 田穗康 ，张琰图 ，罗丽荣 (陕西师范大学 化学与材料科学学院，陕西 西安 710062；2．延安大学 化学化工学院，陕西 延安 716000) 摘 要：基于在碱性介质中，褪黑激素对H：O：与MoO 一反应产生的微弱化学发光信号有较强的 增敏作用。利用高灵敏度、高分辨率的成像分析仪检测发光信号，建立了一种简单、高通量的检测褪 黑激素的分析方法并将该方法用于健康食品脑白金中褪黑激素含量的测定。 关键词：褪黑激素；化学发光；成像 中图分类号：0657．3 文献标识码gA 文章编号：1004-602X(2007)04-0050-03 褪黑激素(Melmonin)主要是由哺乳动物和人 1．6×10一～1．6×10 g／mL呈良好的线性关系， 类的松果体产生的一种吲哚类激素，具有削减精神 检出限为2×10一g／mL，对浓度为1．6×10。g／mL 压力、提高睡眠品质、调节生物时钟、抵抗细菌病毒、 的褪黑激素进行l1次平行测定的相对标准偏差为 控制心脏病痛等功能，当这种激素在体内含量下降 4．O％，与其它方法相比，该法具有操作简单、高通 时，表现为睡眠不佳，适时补充褪黑激素可起到改善 量、试剂耗费少等优点，已用于脑白金片剂中褪黑激 睡眠的作用。市售的保健食品脑白金的有效成分为 素含最的测定。 褪黑激素，因此建立测定脑白金中褪黑激素的含量 1 实验部分 的分析方法在药品质量控制方面具有非常重要的意 义。目前，测定褪黑激素的主要方法有酶联免疫分 1．1 仪器和试剂 析法[¨、高效液相色谱法L2 J、毛细管电泳法 。 及气 带有冷却CCD装置的nuorchem 。MIS一8800荧光 相色谱与质谱联用的方法l5 等。上述方法多数灵 化学发光成像系统(Alpha Innotech，USA)，化学发 敏度较高，但存在操作繁琐、仪器复杂、分析效率低 光图像的采集及处理均利用运行于Windows 2000 等问题。 系统中的Alpha Ease FC软件完成；pHS-3C精密pH 化学发光分析法因其具有仪器简单、操作方便 计(上海雷磁仪器厂)；U2000紫外一可见分光光度计 等优点，已被用于褪黑激素的检测 。化学发光 (日本岛津公司)：透明96孔酶标板(西安化玻站)。 成像法结合了化学发光分析与成像技术的优势，以 O．4 mol／L Na2MoO4储备液，用时以pH 10．5磷 图像的形式记录发光信号，具有操作简单、试剂耗费 酸盐缓冲溶液稀释至所需浓度：1．0 mol／LH：O：储 少、高样品通量等特点 驯。本文的研究工作基于 备液，用时以二次亚沸蒸馏水稀释全所需浓度；褪黑 在碱性介质中，MoO 一与H：O：反应产生单线态氧， 激素标准溶液：准确称取褪黑激素标准品(Sigma公 单线态氧氧化褪黑激素产生化学发光信号 。在 司)O．1l6 lg，用甲醇超声溶解并定容至50 mL，配成 室温条件下，该反应为慢反应，可利用化学发光成像 O．01 mol／L的溶液；褪黑激素样品分别为鲁宾逊药 装置进行检测。据此，建立了测定褪黑激素的高通 品有限公司和美国生命力有限公司生产，所有试剂 量分析方法。化学发光强度与褪黑激素的浓度在 均为分析纯，水为二次亚沸蒸馏水。 收稿日期：2007—03—08 作者简介：田穗康 (195