苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及其在血清尿酸测定中的应用.pdfVIP

第! 卷第# 期第#!$ 页 华中科技大学学报（医学版） =78 !( ?7 #( @ #!$ ( ( ( ( #%% 年 ’ 月 ( ( ( ( )*+, -./ 0123 4*2 5.*6178 9:,;671 )AB ( #%% 苛求芽孢杆菌胞外尿酸酶的表征及 其在血清尿酸测定中的应用# C C C，# C # C，# $ 赵运胜 ( ( 赵利娜 ( ( 杨根庆 ( ( 陶( 佳 ( ( 卜友泉( ( 廖( 飞 C 重庆医科大学 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室( 生物信息学与分子工程研究室， # 基础医学院生物化学与分子生物学教研室，重庆( ’%%%C 摘要( 目的( 考察苛求芽孢杆菌（)5DD #$%’ ）分泌型尿酸酶的特性和将其应用于直接动力学尿酸酶法测定血清 尿酸的有效性。方法( 苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶经KF)FG*.88:87E. 层析纯化后，用于以积分法分析尿酸酶反应曲线 预测反应体系本底的直接动力学尿酸酶法测定血清尿酸。结果( 苛求芽孢杆菌分泌的尿酸酶只含C 种肽链，分子量为 !’ LK（CLK M % $$# C L:），其米氏常数为（% ## N % %C ）HH7C O P（! M CC ），黄嘌呤抑制常数为（! N ! ） H7C O P（! M ’ ）。 ! 用此尿酸酶，只要被分析反应曲线终点的底物浓度低于起点的!%Q ，应用积分法就能可靠预测本底；直接测定反应前吸 收，可使直接动力学尿酸酶法不受常见血清成分、酶活性变化和CR !H7C O P 黄嘌呤等干扰。监测% %#R 0 O H8 尿酸酶反 应R H21 的数据，其线性响应范围为C S R% !H78 O P ；所得临床标本血清尿酸含量（L ）与过氧化物酶偶联间接终点平衡法 （ ）正相关（ M T % %%U V C %’ ，# M % $$ ，! M #% ），但W8,1/G)8+H,1 法分析表明两种方法不一致。结论( 苛求芽 . L . 孢杆菌分泌的尿酸酶可用于直接动力学尿酸酶法测定尿酸，并可保障其优势。 关键词( 直接动力学尿酸酶法；( 血清尿酸测定；( 苛求芽孢杆菌分泌型尿酸酶 中图法分类号( XRRR U !#$#%’$()#(*+ *, #+ -.$#%’//0/#$ 1$(%#2’ ,$*3 !#$%%’ (’)$*$+’ #+4 52 677/(%#(*+ (+ 8($’% 9(+’(% 622#: *, ;’$03 1$(% 6%(4 Y6,7 Z:1E6.1C ，Y6