转基因Bt菌概要1.ppt

转基因Bt菌剂 汇报人：冯婷婷 组 员：张 钦 王偲琦 于 奇 * 主要内容 苏云金芽孢杆菌简介 转Bt基因的应用 影响Bt菌基因在转基因植物中表达的因素 转Bt基因作物的安全性 * 苏云金芽孢杆菌简介 1，苏云金杆菌 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt）1901年由日本细菌学家石渡繁胤 (Ishiwata)首先在受病害的蚕蛾中发现，1911年，德国人贝尔奈(Berliner)从德国苏云金省这个地方的一家面粉厂里的地中海粉螟上又重新分离到一种有很强杀虫力的细菌,并正式定名为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t.)。苏云金芽孢杆菌简称苏云金杆菌，是内生芽孢的革兰氏阳性土壤细菌，在芽孢形成初期会形成杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal protein)，对敏感昆虫有特异性的防治作用。 * * 2，Bt 杀虫晶体蛋白 Bt 杀虫晶体蛋白分为Cry 类蛋白和Cyt 类蛋白2大类 。目前应用最广的主要是 Cry 类 Bt 杀虫晶体蛋白。根据杀虫谱的不同，将 Cry 杀虫基因分成 7 大类 29 个亚类。 在转基因植株体内，未加改造的Bt基因在转基因植物中表达水平很低， 含量是植株内全部可溶性蛋白的0.001％ 以下，不能直接毒杀害虫。因此，必需对Bt基因进行修饰改造，以提高其在植株中的表达量及稳定性。 * 3，Bt蛋白的杀虫机制 Bt杀虫蛋白基因编码的伴孢晶体蛋白(ICPs)，它是细菌在形成芽孢时产生的晶体，典型的ICP相对分子质量为130×103左右，由两部分构成，N端的活性片段和C端的结构片段，带有结构片段的ICP称原毒素，经蛋白酶消化后，产生有活性的毒性肽。 ICP为碱溶性蛋白，被敏感昆虫取食后，在昆虫消化道内消化酶的作用下，蛋白被水解，释放出约(60—70)×103抗蛋白酶核心肽段，作用于昆虫中肠上皮细胞，与中肠道上皮细胞纹缘膜上的特异性受体结合，使细胞膜穿孔，消化道细胞的离子、渗透压平衡遭到破坏，最终导致昆虫死亡。 ICP的杀虫特异性受ICP的溶解性和昆虫消化酶体系的影响。 苏云金芽孢杆菌简介 * * 转Bt基因的应用 转Bt基因作物 转Bt基因作物就是通过基因操作把Bt基因导入到作物中，使Bt杀虫蛋白在作物中表达，从而达到杀虫目的。 应 用 将编码Bt杀虫晶体蛋白的基因转化到作物中，以获得转基因抗虫作物是近代掌握基因工程技术应用的成功范例。 自1981年克隆出第1个Bt的ICPs基因，转Bt基因抗虫植物就引起了极大关注。表达Bt内毒素的转基因作物可以控制一些害虫，并对虫害防治水平显著 。如转Bt基因草地早熟禾植株对 1～2 龄棉铃虫均具有抗性 ， 其棉铃虫幼虫校正死亡率可高达70以上。转CryI (c) 基因和CryI（IA ）基因的双价抗虫棉 ， 不仅高抗棉铃虫等鳞翅目害虫，而且还抗双翅目等棉花害虫。 * 影响Bt菌基因在转基因植物中表达的因素*** 表达单元及辅助因子 植物发育 外部环境条件 受体植物的遗传背景 Bt基因在受体细胞染色体上的插入位点 转基因植物中Bt基因的沉默 * 转Bt基因作物的安全性 *** 昆虫对转Bt基因作物的抗性及预防 由于转Bt基因植物能够持续地高水平表达单一的杀虫毒蛋白，因此Bt植物对害虫造成的选择压力甚至比Bt杀虫剂还高，Bt植物的释放将会加速害虫的抗性进化。 多采用“高剂量／庇护”策略。高剂量指的是作物中的Bt蛋白表达量很高，足以杀死全部害虫幼虫；“庇护”是指在种植Bt作物的同时种植一定比例的非Bt作物，使害虫可在非转基因作物上取食，以减轻Bt蛋白对害虫的选择压。 转Bt基因作物对非靶生物的影响 * 转Bt基因作物的安全性 *** 转Bt基因作物的致敏性 Bt基因来源于苏云金杆菌，而苏云金杆菌作为生物杀虫剂的历史证明它不是过敏原；而且转Bt基因抗虫作物中表达的一些主要蛋白。未被发现与已知过敏原具有相似的氨基酸序列或蛋白质结构，因此，转Bt基因作物作为过敏原引起致敏反应的可能性很小。 转Bt基因作物的毒性 到目前为止，还未发现转Bt基因作物对生态环境和人类安全造成负面影响，可能是因为转Bt基因作物出现的历史还比较短，一些副效应还处于潜伏期，还未被发现，也可能是因为转Bt基因作物本身就安全的。 * 谢谢 请老师同学批评指正