药物分析 第八章 抗生素类药物的分析.ppt

第十章　抗生素类药物的分析 The Analysis of Aantibiotic drugs 第一节　概　　　述 抗生素的来源: ＊多数抗生素生物合成(发酵) ＊少数化学合成或者半合成 1、抗生素类药物一般检查项目： ①鉴别试验: 用化学法、物理化学法以 及生物学法来确认是哪种抗生素 ②毒性试验: 控制药品中的毒性物质 ③无菌试验: 检查药品中有无杂菌污染 ④热源试验: 控制药品中的致热物质 ⑤水分测定: 控制水分含量 ⑥溶液澄明度检查: 检查不溶性物质 ⑦?溶液pH试验: 测定pH ⑧降压试验: 检查有降压作用的杂质 ⑨?? 效价测定: 有效成分测定 生物学法 物理化学法 (1)???? 生物学测定法 以抗生素抑制细菌生长能力或杀菌能力作为衡量效价标准 ③?既适用较纯精制品,也适用于纯度 较差的产品 ④?已知或新发现抗生素都能应用 ⑤ 同一类型的抗生素,不需要分离, 可一次测定它们的总效价。 缺点 ①?? 操作步骤多，测定时间较长 ②?? 误差较大 (2)???? 物理化学测定法 根据抗生素化学结构利用其特有的化学或物理化学性质及反应进行。 缺点: 对于结构相似的抗生素，测定结果往往只能代表总的含量，并不一定能代表某一抗生素的生物效价，只有当用物理化学法测定结果与用生物学法测定效价相一致时，才能用于效价测定。 3、本章内容 ＊ ?-内酰胺类: 青霉素类头孢菌素类 ＊氨基糖苷类: 链霉素　庆大霉素 ＊四环素类: 第二节　?-内酰胺类抗生素的分析 一、化学结构与性质 1、化学结构 ①?? 青霉素类结构 ＊青霉素类: 母核: 由?-内酰胺环和氢化噻唑环 组成的双杂环。 6-APA 6-Aminopenicillanic Acid 侧链 : RCO-　　 ②? 头孢菌素类结构 2、性质 青霉素类和头孢菌素类结构共同特点具有?-内酰胺环。 ①?? 酸性 ＊有羧基，具有酸性 ＊pKa值在2.5~2.8之间 ＊与碱成盐 如：青霉素G钠、青霉素G钾等 ②? 旋光性 有手性碳原子，具有旋光性 ③? 紫外吸收 ＊ 青霉素类母核没有共轭系统，没有紫外吸收 ＊但青霉素类药物在弱酸性下水解，可以产生具 有共轭双键的青霉烯酸，在紫外光区有吸收。 ＊侧链中有苯环等取代基的药物，在紫外光区也 有吸收。像苄青霉素。 ④? ?-内酰胺环的不稳定性 干燥、纯净青霉素类抗生素稳定，其水溶液很不稳定.不稳定的部分是?-内酰胺环 ?-内酰胺环在酸、碱、青霉素酶、某些金属离子的作用下，可使?-内酰胺环开环或发生分子重排，而失去抗菌作用。 二、鉴别试验 2、青霉素的各种盐的鉴别 3、硫酸及硫酸-甲醛反应 4、硫酸-变色酸反应 5、紫外分光光度法及红外分光光度法 三、含量测定 ①?? 方法 (ⅰ) 水解前：将样品溶液的pH调至8 以“青霉素钠”为例 ChP 90 ③?? 讨论 (ⅰ) 溶剂 新沸过且用0.01M NaOH液中和的水 目的：消除水中酸性物质影响（如CO2） (ⅱ) 滴定前中和 消除能消耗碱的杂质影响（如一些酯 类杂质） (ⅲ) 空白试验目的: 在加热水解过程中，有可能会吸收CO2，对测定有影响，所以要做空白试验校正。 (ⅳ) 本法供试品用量较大，多用于效价高的供试品的测定 2、碘量法 ②方法： 以“青霉素钠”为例，ChP 二部 （2）空白试验： ③ 讨论： （1）溶液的pH值在4.5左右 （2）温度：24~26℃ （3）放置时间：15~20′ （4）空白试验：做法与一般空白不同 （加样品,不加碱水解,其他操作同样品） ＊目的：消除样品中预先存在的降解产物 （青霉噻唑酸）及其他耗碘杂质的影响 （5）灵敏度高：因为1:8，所以供试液浓 度在10~100μg/ml即可测定 3、汞量法 4、可见—紫外分光光度法 ① 原理： 青霉素在弱酸性下（pH=4），不完 全水解，产生青酶烯酸，在320—360nm 处有强吸收。 青霉烯酸在酸性溶液中极不稳定，有 两种改进方法。 （1）铜盐法（JP1