EPO对早期糖尿病大鼠肾脏的保护作用.docVIP

　　EPO对早期糖尿病大鼠肾脏的保护作用 【摘要】 　　目的 观察亚临床剂量EPO对糖尿病大鼠早期肾损伤的影响，并探讨其作用机制。方法 将大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及糖尿病EPO干预的两个剂量亚组(DMTA和DMTB)。采用链脲佐菌素诱导1型糖尿病大鼠模型，腹腔注射EPO 10周后，测定血糖、血压、血红蛋白、肾功能；光镜及电镜下观察肾组织形态学变化；免疫组化分析肾组织细胞凋亡相关蛋白Bcl2/Bax及细胞因子VEGF的表达。结果 实验剂量EPO干预后，大鼠肾功能及其形态学指标得到显著改善；Bcl2/Bax比值及VEGF表达升高；均呈剂量依赖性。血糖、血压、血红蛋白值与对照组相比无明显变化。结论 亚临床剂量EPO可延缓早期糖尿病肾病发展进程，可能与上调Bcl2/Bax蛋白表达比值，抑制肾脏细胞凋亡有关；在本实验条件下，肾组织VEGF的表达上调未对糖尿病肾病造成不良影响。 【关键词】 糖尿病肾病；促红细胞生成素；细胞凋亡；Bcl2/Bax；血管内皮生长因子；大鼠 　　ABSTRACT: Objective To study the effect of subclinical dosage of EPO on early renal lesions of diabetic rats. Methods The rats ly divided into normal control group (NC), diabetic group (DM), diabetic rats treated orphological parameter, the expression of cell apoptosis associated protein Bcl2/Bax and VEGF easured. Results After treatment of EPO, renal functional and morphological indexes proved significantly and the ratio of Bcl2/Bax and VEGF increased, both in a dosedependent manner. Blood sugar, blood pressure and hemoglobin concentration had no significant differences. Conclusion Subclinical dosage of EPO could play an advantageous role in diabetic nephropathy. Inhibition of cell apoptosis by upregulation of Bcl2/Bax expression rate may be responsible for renal protective effects despite the upregulation of VEGF. 　　KEY 注射用重组人促红素(rebinant human erythropoietin, rhEPO，成都地奥九泓制药厂)，大鼠专用尿白蛋白放免试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司，批内变异系数为3.1%-5.8%)，Bcl2多克隆抗体和Bax多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)，VEGF多克隆抗体(美国NeoMarkers公司)，EliVisonTMplus广谱试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)，HITACHI 7170自动生化分析仪(日本)，H600型透射式电子显微镜(日本)，Motic Image Advanced 3.2高级图像处理软件。 　　1.2 造模方法与分组 　　雄性SD大鼠(体重200-260g)44只，随机取10只作为正常对照(NC组)；余34只予腹腔注射STZ 60mg/kg制备糖尿病模型，3d后测血糖gt;16.7mmol/L持续10d，确定为糖尿病模型制备成功[3]。成模率100%。将成模大鼠随机分为糖尿病非治疗组(DM组)12只；小剂量EPO干预组(DMTA组)11只，给予rhEPO 30u/kg，每周3次腹腔注射；大剂量EPO干预组(DMTB组)11只，给予rhEPO 50u/kg，每周3次腹腔注射。以上干预剂量为亚临床剂量，对实验动物的血压和血红蛋白值均不产生显著影响，参考Yalcin[4]及Lee等[5]的研究，并由预实验获得。干预治疗10周后检测相应各项指标。期间，DM、DMTA、DMTB三组大鼠隔日注射鱼精蛋白锌胰岛素2u，以防止其血糖过高导致酮症酸中毒而死亡。实验结束时,死亡4只(DM组2只，DMTA及DMTB组各1只)，病死率12%，无自发缓解