转基因改良面粉白度梁荣奇2012922汇编.pptVIP

T1代转基因植株的PCR检测 ——FAD2Intron 1000bp 1-1、5、7、11 、18、21；2-1、2、4、5、7、8、10、12、13、16、23、29； 4-1、2、4、5、7、8、20、 23、 29；5-7、13、14、16、17、19、21、27、28；12-2、5、7、 8 、 9、14；13-4、7、8；17-5、10、17；20-5、8；24-8；25-3、6、10、27；26-5 这56株为转入FAD2Intron片断的植株。 T2代籽粒的半定量RT-PCR ppo actin ppo actin CK 1 2 3 4 5 6 7 CK 8 9 10 11 12 13 14 ppo的相对表达量 转基因T2代株系灌浆期籽粒 转基因株系ppo基因表达的半定量RT-PCR Northern 杂交 “-”：阴性对照 1-14：转基因植株 T2代转基因籽粒Northern杂交检测 - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 结果：1-5、1-11、2-1、2-7、2-23、4-2、4-8、4-20、4-29、5-13、5-14、5-27、12-5、12-7、12-9、13-4、17-10、17-17、20-5、25-27这20株为ppo含量被抑制的植株。 主要内容 一、立论依据 二、载体构建及转基因植株的获得 三、转基因植株的分子检测 四、面粉白度改良效果 五、转基因安全评价 T2代转基因籽粒的PPO酶活性测定 ——酶标板法 株号 CK 4-8 5-27 12-7 13-4 17-10 20-5 OD值 0.048 0.023 0.006 0.010 0.027 0.009 0.040 PPO酶活 24.0 11.5 3.0 5.0 13.5 4.5 20.0 T2代转基因籽粒的PPO酶活性测定 白度/wh 时间/hr 5个T3代转基因株系的面片白度测定 CK 17-10 24 hr CK 17-10 0 hr CK 17-10 12 hr T4代转基因株系17-10的面片白度测定（2009-11） 主要内容 一、立论依据 二、载体构建及转基因植株的获得 三、转基因植株的分子检测 四、面粉白度改良效果 五、转基因安全评价 申报了农业部转基因安全评价 ——中间试验，获得了农业部审批 转ppo基因RNA干扰品质改良小麦1-5等在北京市的中间试验 （农基安办字2008-T084，2009年2月4日） T5株系 统计数 株高/cm 穗长/cm 分蘖数 千粒重/g 单穗粒数 穗粒重/g 1-5 184 54.63 7.84 5.23 32.25 29.19 0.92 1-11 131 62.69 15.05 9.42 36.62 28.60 1.04 2-1 191 66.26 8.07 8.24 38.49 29.68 1.14 2-23 80 63.21 8.17 7.98 37.15 33.60 1.25 2-29 187 61.03 7.90 6.99 39.75 33.60 1.33 4-2 274 64.01 7.93 7.36 36.60 29.39 1.07 4-5 221 59.51 7.84 6.60 39.12 27.85 1.10 4-8 192 57.77 7.82 5.05 40.13 25.22 1.01 4-20 172 64.72 8.46 7.36 36.81 27.71 1.08 5-13 200 63.35 8.01 7.33 38.12 27.50 1.00 5-14 199 62.75 7.87 7.69 36.72 31.55 1.15 5-17 154 59.86 8.41 6.38 35.95 31.36 1.13 5-19 197 65.38 8.22 7.55 37.37 31.12 1.16 5-27 160 63.86 8.18 7.14 39.16 29.15 1.08 25-27 175 54.44 7.73 5.13 34.66 32.36 1.