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达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存
46 5 2016 9
第 卷 第 期 淡 水 渔 业 年 月
Vol. 46 No. 5 Freshwater Fisheries Sep. 2016
达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存
1 ，2 2 2 ，3 2 ，3 2 2 2 1 ，2 ，3
， ， ， ， ， ， ，
颉 璇 厉 萍 席萌丹 郭 威 乔新美 杜 浩 刘志刚 危起伟
(1. ， 4007 15 ;
西南大学生命科学学院 重庆
2. ， ， 430223 ;
农业部淡水生物多样性保护重点实验室 中国水产科学研究院长江水产研究所 武汉
3. ， 430072)
中国科学院水生生物研究所 武汉
: ， 、 、 (Acip enser dab-
摘要 通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果 探究抗冻剂 降温程序 糖类和卵磷脂对达氏鲟
ryanus) ， 。 0. 25% 2 mg / mL
精巢细胞冻存效果的影响 获得消化冻存后高存活率的细胞 实验使用 胰蛋白酶和 胶原
H + 500 U / mL II ， 。 ，
酶 中性酶 的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化 获得不同消化时间内的活细胞数量 另外 还
10% (DMSO)、 (EG)、 (MET) ， － 1 ℃ /
研究了冷冻稀释液中分别添加 二甲基亚砜 乙二醇 甲醇 作为抗冻剂 采用
min ， D- D- ，
慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存 冷冻稀释液采用 海藻糖或同浓度 蔗糖 以及添加
5% 、8% 、11% 。 :
卵磷脂对冻存效果的影响 结果显示 两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率
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