竞争包结法研究印楝素与β环糊精及其衍生物的选择.docVIP

　　竞争包结法研究印楝素与β环糊精及其衍生物的选择 【摘要】 以酚酞作为光谱探针，采用紫外可见光谱滴定法测定了β环糊精(βCD)，单(6脱氧乙二胺)β环糊精(enβCD)，单(6脱氧二乙基三胺)β环糊精(dienβCD)，七(2,3,6三O甲基)β环糊精(TMβCD)，七(2,6二O甲基)β环糊精(DMβCD)，2羟丙基β环糊精(HPβCD) 在25 ℃时，pH=10.5缓冲液中与两种印楝素客体分子所形成超分子配合物的稳定常数。结果表明，多种弱相互作用力协同作用于环糊精的配位过程，主客体间的尺寸匹配决定所形成配合物的稳定性，环糊精衍生物的取代基影响主体配位能力。6种环糊精主体化合物对印楝素客体分子的包合能力的大小为：HPβCDgt; enβCD≈dienβCDgt;βCDgt; DMβCD≈TMβCD。对印楝素A和B给出相似的键合能力。 【关键词】 β环糊精，酚酞， 印楝素，竞争包结， 选择键合 1 引 言 　　近年来，人们对印楝的提取物作为昆虫拒食剂、昆虫生长调节剂的活性和应用进行了广泛的研究[1]。印楝提取物作为天然药物的应用也被广泛研究和报道[2,3]。在被称为柠檬素的四环三萜类提取物中，印楝素A (Azadirachtin A, AZA)和印楝素B (3Tigloylazadirachtol，AZB)(结构见图1) 是最主要的活性化合物[4]。然而，印楝素的应用前景受到其自身低水溶性和不稳定性的限制[5]，引入一些无毒的助溶剂可提高印楝素水溶性和稳定性，如李云寿[6]和徐汉虹[7]等制备了含有各种添加剂的印楝素微乳剂，但未能使印楝素真正溶解在水中。 　　环糊精分子具有疏水性空腔和亲水性表面，其空腔可以在水溶液中装载不同的有机客体分子，形成主客体配合物或超分子体系，可增强客体分子的水溶性，改变客体分子的理化性能[8，9]。近年来，关于β环糊精及其衍生物与印楝素包结行为机理和包合物水溶性、稳定性的研究已有报道，为制备含有印楝素的水溶性、高生物活性和低毒性的生物农药和保健药物提供新的途径[10，11]。 　　然而，印楝素的紫外最大吸收峰靠近200 nm，天然环糊精和修饰环糊精都有吸收干扰，常规的紫外光谱滴定法不能测量印楝素的配位稳定常数。另外，由于此配位包合过程的热焓较低，量热滴定法也无法实施[10]，采用紫外和荧光竞争包结法研究光学惰性客体与环糊精的配位稳定常数是一种合理、有效的方法[11～13]。因此，本研究采用酚酞为光谱探针，利用竞争包结法测定印楝素A和B与β环糊精及其衍生物的配位稳定常数，研究了印楝素和环糊精的选择性键合。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　UV 3600紫外可见分光光谱仪(日本岛津公司)。印楝素A和B(纯度均为90%，由本实验室从印楝种仁中提取，经过柱层析分离纯化);乙二胺β环糊精[enβCD，MS (ESI): m/z 1177.43 (M+H+); 1H NMR (D2O, TMS, ppm): δ 2.4～2.9 (m, 4H), 3.2～4.0 (m, 42H), 4.90 (s, 7H)]和双乙二胺β环糊精[dienβCD，MS (ESI): m/z 1120.43 (M+H+); 1H NMR (D2O, TMS, ppm): δ 2.4～2.9 (m, 8H), 3.2～4.0 (m, 42H), 4.90 (s, 7H)]分别根据文献[14,15]报道的工艺过程制备;2,3,6全甲基化β环糊精(TMβCD)，2,6甲基化β环糊精(DMβCD)，β环糊精和羟丙基β环糊精(HPβCD, 平均摩尔取代度为7.0)为商品化试剂(百灵威化学技术有限公司);酚酞(分析纯，上海试剂三厂)。其它试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。V(乙醇)∶V(水)= 1∶5混合液用于紫外可见光谱实验。0.1 mol/L Na2CO3NaHCO3缓冲体系(pH 10.5)。 　　2.2 光谱滴定实验 　　准确移取1 mL 2.35×10-4 mol/L酚酞于10 mL容量瓶中，加入0.005～0.5 mol/L 的环糊精溶液，采用0.1 mol/L Na2CO3NaHCO3缓冲体系控制溶液的pH为10.5，用V(乙醇)∶V(水)=1∶5混合液定容。在(25±1)℃下放置1 h，扫描紫外光谱，特定吸收波长为553 nm，其生色基团的最大吸收值呈规律下降，测量出每一环糊精浓度对应的ΔA。然后固定酚酞的浓度为3×10-4 mol/L，环糊精的浓度为5×10-4 mol/L，加入印楝素，于0.005～0.5 mol/L的范围内逐渐增大印楝素的浓度，在(25