拟南芥硫酯酶基因（atfata）在大肠杆菌中的表达及其对游离脂肪酸合成 .pdf

2011 17 4 ): 568~571 2011-08-25 应用与环境生物学报 ， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2011.00568 拟南芥硫酯酶基因（atfata ）在大肠杆菌中的表达及其 对游离脂肪酸合成的影响* 1 2 2 3 1 2** 程 涛 杨建明 刘 辉 张英伟 宋秋华 咸 漠 1 （江西理工大学材料与化学工程学院 赣州 341000） 2 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 青岛 266101) （ (3旭阳控股有限公司 北京 100070) 摘 要 硫酯酶催化脂酰 ACP （酰基载体蛋白）水解生成游离脂肪酸和ACP载体蛋白，能够解除脂肪酸合成与磷脂合 成的偶联，是获得游离脂肪酸的关键基因. 将拟南芥的硫酯酶基因atfata克隆到原核表达载体pET30a上，在大肠杆菌 BL21(DE3)中成功表达了His-tag融合蛋白，经 SDS检测获得特异性表达条带. 对该重组菌株进行摇瓶发酵实验， GC-MS检测表明其与对照菌株脂肪酸组成并未发生变化；但其脂肪酸产量达到232.06 mg/L ，比对照菌株提高了70% ； 同时胞外游离脂肪酸产量达到了33 mg/L ，占总脂肪酸含量的15%，是野生菌株胞外脂肪酸产量的7倍. 图3 表2 参 17 关健词 拟南芥；硫脂酶；工程大肠杆菌；胞外游离脂肪酸 CLC Q939.9 : Q78 Expression of Arabidopsis thaliana Thioesterase Gene (atfata) in Escherichia coli and Its Infl uence on Biosynthesis of Free Fatty Acid* 1 2 2 3 1 2** CHENG Tao , YANG Jianming , LIU Hui , ZHANG Yingwei , SONG Qiuhua XIAN Mo 1 ( College of Material Science and Chemical Engineering, Jiangxi University of Science and Technology, Ganzhou 341000, China) (2Qingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess Technology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266101, China) (3Xuyang Holding Ltd., Beijing 100070, China) Abstract Acyl-acyl carrier protein (ACP) thioesterase catalyzes the h