黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究 - 吉林农业大学学报.pdf

吉林农业大学学报　 ２０１６，３８（６）：６８１～６８５ ｈｔｔｐ：／ ／ ｘｕｅｂａｏ．ｊｌａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｌｎｄｘｂ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究∗ 杨海燕，汤飞云，方　 亮，吴文龙，李维林∗∗ 江苏省中国科学院植物研究所，南京２１００１４ 摘　 要：为获得黑莓细胞悬浮培养的最佳条件，以黑莓品种Ｋｉｏｗａ 无菌苗叶片、叶柄产生的质地疏松的嫩黄 色颗粒状愈伤组织为初始材料，考察了培养基种类、糖种类、蔗糖浓度、激素种类、２，４⁃Ｄ 浓度、水解酪蛋白浓 度对细胞悬浮培养效果的影响。 结果表明：以ＭＳ 为基础液体培养基、３０ ｇ／ Ｌ 蔗糖为碳源、附加 １０ ｍｇ／ Ｌ ２，４⁃Ｄ和２００ ｍｇ／ Ｌ水解酪蛋白处理愈伤组织，悬浮培养的效果最佳，可以获得最大生物量。 关键词：黑莓；愈伤组织；细胞悬浮培养 中图分类号：Ｓ６６３２　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃５６８４（２０１６）０６⁃０６８１⁃０５ ＤＯＩ：１０．１３３２７／ ｊ．ｊｊｌａｕ．２０１６．２８５３ 引文格式：杨海燕，汤飞云，方亮，等．黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究［Ｊ］．吉林农业大学学报，２０１６，３８ （６）：６８１⁃６８５． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｃｅｌｌ Ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｂｌａｃｋｂｅｒｒｙ Ｃａｌｌｕｓ ＹＡＮＧ Ｈａｉｙａｎ，ＴＡＮＧ Ｆｅｉｙｕｎ，ＦＡＮＧ Ｌｉａｎｇ，ＷＵＷｅｎｌｏｎｇ，ＬＩＷｅｉｌｉｎ∗∗ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ，ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ ａｎｄ ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｏｂｔａｉｎｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒ ｃｅｌｌ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ，ｌｏｏｓｅ，ｂｒｉｇｈｔｙｅｌｌｏｗ ｇｒａｎｕｌａｒ ｃａｌｌｕｓｅｓｉｎｄｕｃｅｄｆｒｏｍｌｅａｖｅｓａｎｄｐｅｔｉｏｌｅｓｏｆ ｂｌａｃｋｂｅｒｒｙ Ｋｉｏｗａｗｅｒｅｕｓｅｄ ａｓｍａｔｅｒｉａｌｓｉｎｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｄｉｕｍ ｔｙｐｅ， ｓｕｇａｒ ｋｉｎｄ， ｓｕｃｒｏｓｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ， ｈｏｒｍｏｎｅ ｋｉｎｄ，２，４⁃Ｄ ａｎｄ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｃａｓｅｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｃａｌｌｕｓ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ＭＳ ｂａｓｉｃ ｌｉｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ， ３０ ｇ／ Ｌ ｓｕｃｒｏｓｅ， ｐＨ ６０， １０ ｍｇ／ Ｌ ２，４⁃Ｄ， ２００ ｍｇ／ Ｌ ＣＨ，２ ｇ／ ５０ ｍＬ ｉｎｏｃｕｌｕｍ ａｍｏｕｎｔ ａｎｄ ｄａｒｋ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｃａｎ ｅｎｓｕｒｅ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｂｉｏｍａｓｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｂｌａｃｋｂｅｒｒｙ；ｃａｌｌｕｓ；ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ 　 　 黑莓（Ｒｕｂｕｓ ｓｐｐ．）是蔷薇科悬钩子属（Ｒｕ⁃ 的天然维生素Ｅ 是可行的。 本研究针对天然维 ［１⁃４］ ｂｕｓ）的一种多年生浆果类果树 ，其果实中富含 生素 Ｅ 生产中存在的产量较小、活性较低等问 维生素Ｅ。 维生素 Ｅ 是一种脂溶性的强抗氧化 题，以黑莓品种Ｋｉｏｗａ无菌苗的叶片、叶柄愈伤组 ［５］ 剂 ，具有多种生理功能，历来倍受重视，被广泛 织为初始材料，从培养基种类、糖种类、蔗糖浓度、 地应用于食品、化妆品、医药和动物饲料制品中。 激素种类、２，４⁃Ｄ浓度、水解酪蛋白（ＣＨ）浓度这 植物组织培养可能是大量生产具高活性天然维