外源性蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的策略综述.pdf

第３７卷 第５期 世界科技研究与发展 Ｖｏｌ．３７ Ｎｏ．５ 　 　 ２０１５年１０月 ６２７－６３０页 ＷＯＲＬＤＳＣＩＴＥＣＨＲ＆Ｄ Ｏｃｔ．２０１５ ｐｐ．６２７－６３０ 外源性蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的策略综述 １ ，２ １ 马媛媛 　何健民 　康永杰 （１．兰州大学口腔医学院，兰州７３００００；２．甘肃省人民医院口腔科，兰州７３００００） 摘　要：大肠杆菌表达系统因其自身众多的优点而成为表达外源性蛋白的首选，但是有些情况下，外源性蛋白在大 肠杆菌中表达时因不能正确折叠而形成不可溶性的包涵体。因此，学者们为提高重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性 表达采用了多种方法，包括应用促溶标签、改变大肠杆菌表达菌株、分子伴侣的共表达和折叠调节器等。本综述对 近几年来常用的促进外源性蛋白可溶性表达的策略进行了归纳和总结。 关键词：大肠杆菌；包涵体；外源性蛋白；伴侣蛋白 中图分类号：Ｑ８１６　　　文献标识码：Ａ　　　ｄｏｉ：１０．１６５０７／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－６０５５．２０１５．０５．０３３ ＲｅｖｉｅｗｓｏｎＳｔｒａｔｅｇｉｅｓｏｆＥｎｈａｎｃｅＨｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓＰｒｏｔｅｉｎ ＳｏｌｕｂｌｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａＣｏｌｉ １ ，２ １ ＭＡＹｕａｎｙｕａｎ　ＨＥＪｉａｎＭｉｎ 　ＫＡＮＧＹｏｎｇｊｉｅ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＳｔｏｍｏｌｏｇｙ，ＬａｎｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００００； ２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，ＧａｎｓｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００００） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｙｓｔｅｍｈａｓｂｅｃｏｍｅａｆｉｒｓｔｃｈｏｉｃｅｔｏｅｘｐｒｅｓｓｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｂｅｃａｕｓｅｏｆｉｔｓｎｕｍｅｒ ｏｕｓａｄｖａｎｔａｇｅｓ，ｂｕｔｓｏｍｅｔｉｍｅｓｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｃａｎｍａｋｅｉｎｃｏｒｒｅｃｔｆｏｌｄｉｎｇａｎｄｆｏｒｍｉｎｓｏｌｕｂｌｅｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｏｄｉｅｓｉｎＥｓｃｈ ｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ．Ｓｏｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｕｓｅａｖａｒｉｅｔｙｏｆｍｅｔｈｏｄｓｔｏｅｎｈａｎｃｅｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｈａｎｇｅｔｈｅｅｘ ｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｓｕｃｈａｓｕｓｅｏｆｅｎｈａｎｃｉｎｇｆｕｓｉｏｎｔａｇｓ，ｃｈａｎｇｅｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓ，ｃｏｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｐｅｒｏｎｅ ａｎｄｆｏｌｄｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｏｒ．Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｔｈｅｃｏｍｍｏｎｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｔｏｅｎｈａｎｃｅｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ；ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｏｄｉｅｓ；ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｐｅｒｏｎｅ 株和纯化系统等众多优点，常作为表达外源性蛋白 １　引言 ［２］ 的首选 。但是，该系统也存在着许多缺陷，如重 无论是基础研究还是临床应用都需要大量纯化 组蛋白在大肠杆菌表达系统中易形成不可溶性的蛋 且可溶的功能性蛋白质，但是从自然资源中获得抗