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蛇毒纤溶酶al f 基因在大肠杆菌中的表达ξ
( )
第34 卷 第 12 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 . 34 . 12
V o l N o
2006 年 12 月 . . . . ( . . . ) . 2006
Jou r o f N o r thw e st Sci T ech U n iv o f A gr i an d Fo r N at Sci E d D ec
蛇毒纤溶酶AL F 基因在大肠杆菌中的表达
张守涛, 史 婧, 李 楠, 郭蔼光
( 西北农林科技大学 农业分子生物学陕西省重点实验室, 陕西 杨凌 7 12 100)
[ 摘 要] 根据蛇毒纤溶酶 ( , ) 氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性, 设计了 14 条单链
A lfim ep ra se AL F
, 采用重叠延伸 方法人工合成了 基因编码区。通过克隆使其分别连接在融合标签 ,
DN A PCR A L F N u sA T h io redox
, , 和信号肽 的 端, 构建成了多种 表达载体 43 , 25 , 32 , 15 和
in Skp H is T ag p e lB C A L F p A lf p A lf p A lf p A lf p Skp
, 转化大肠杆菌后进行了诱导表达, 并对表达产物进行了 分析。实验结果表明, 合成的 基因长
A lf SDD PA GE A L F
度为603 ; 构建的表达载体在大肠杆菌中均获得了很好的表达, 其中 表达量最高, 目的蛋白含量高达菌
bp p Skp A lf
体总蛋白的45% 。
[ 关键词] 蛇毒纤溶酶; 循环延伸PCR ; 基因表达; Skp
[ 中图分类号] 786 [ 文献标识码] [ 文章编号] 167 19387 (2006) 12002 10
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