紫外分光光度法同时测定四种嘌呤含量论文.pdfVIP

2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 紫外分光光度法同时测定四种嘌呤含量 李楠，魏士刚，程庆红，王英华’ (吉林大学化学学院，长春130012) 嘌呤是构成核酸的基本碱基，其衍生物具有特殊的药理作用和生理功效。嘌呤类化合物能 影响神经系统的活动，产生心血管效应，有镇静、解痉、扩张血管、降低血压等生理活性。但人 体内嘌呤代谢异常会引起痛风【l】o目前关于嘌呤衍生物的分离与测定已有相关报道【2】’但腺嘌呤、 黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟嘌呤同时测定报道很少。嘌呤类生物碱基在紫外光区具有强烈吸收特性， 用紫外分光光度法测定嘌呤的总量是一种快速、简便的方法，但各种嘌呤问的吸收光谱严重重叠， 无法单独测定。本文将紫外分光光度法与人工神经网络相结合，实现了四种嘌呤含量同时测定。 l实验方法 1．1试剂 分别适量称取腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟嘌呤的对照品，加少许水溶解后定容至25mL 容量瓶中，溶液浓度均为5．000 mg／mL。 1．2仪器 SHIMADZU Pentium 星仪器设备厂)；lenovo 4电脑。 1．3实验方法 吸取一定量的各嘌呤对照品分别配制成一系列不同浓度的溶液，在各自的最大吸收波长处测 nm．300 nlll．286rim 溶液分别配制不同配比的混合样品。在200 rim波长范围内进行扫描，在236 波长之间每隔5nm取一吸光度值。 2结果与讨论 2．1体系pH值的确定 在同一波长下测定不同pH值的各嘌呤溶液的吸光度值，结果表明溶液的pH在8～10时体 系较稳定，故试验中选择Nil3-Nil4C1缓冲溶液，控制体系pH为9．1。 2．2人工神经网络计算参数的选定 2．2．1 隐含层节点数的选择计算表明，选择精度￡=O．001作为迭代终止条件。计算中对学习样 本进行训练发现，当隐含层节点数过多(大于150)时，由于计算量过大，学习速度明显下降， 甚至得不到结果；而当隐含层节点数过少(小于75)时，则容易发生振荡现象；实验选择隐含 层节点数为100。 2．2．2学习速率的选择学习速率通常为(O，1]，但是学习速率过大，会导致网络不稳定，产生 振荡现象，不能得到稳定的结果；如果学习速率过小，学习时间就会增长，还有可能陷入局部极 。通讯联系人 71 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 小，得不到准确的结果：实验选择学习速率为O．8。 2．3实验结果 按1．3实验方法测得一系列不同配比的各嘌呤混合溶液的吸光度值，对输入输出数据进行归 一化处理后用人工神经网络程序进行运算，其结果见表1。四种嘌呤的相对误差为-18％～17％， 五次测量的相对标准偏差为O．53％～3．7％。 表1混合样品分析结果 腺嘌呤 次黄嘌呤 鸟嘌呤 黄嘌呤 序 加 测 相对 加 测 相对误 柄 测 相对 加 测 相对 号 入 得 误差 入 得 差 √： 得 误差 入 得 误差 “8 量 值 (RE呦量 值(RE呦 值 (RE呦量 值 限E呦 1 1．0 1．003 O．30 1．0 0．9968 ．0．32 1．0 1．016 1．6 2．0 1．975 -1．3 2 1．5 1．439 -4．2 1．5 1．472 -1．9 2．0 2．013 O．65 2．0 1．633 -18