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全波长扫描式多功能读数仪 操作规程 Thermo Scientific Varioskan? Flash 厦门大学医学院中心实验室 隋华秀 2016年10月 一、开机： 轻按仪器左侧的按钮启动仪器，仪器启动后有2分钟左右的全面自检，自检完成后 LED 灯由黄色转为绿色，显示仪器正常。 二、工作站使用： 1、仪器自检结束后，打开电脑，双击 启动工作站，输入默认用户名“admin”，无密码，点击“OK”进入软件。 A、调用已有程序：在工作站界面点击 Open Session ，选择打开已有的程序（程序前面的图标为 ）。 B、新建程序：在工作站界面点击New session 新建程序： a、在新对话框内给程序命名，在 处输入文件名， 点击 Next； b、在新对话框内选择您所用的微孔板，如96 孔平底板，您可以选择默认版型 Use default， 点击 Next。 2、点击Finish进入程序编辑界面： 选中 ，点击右上角 进入填充向导界面： A、红色代表当前孔，您所设置的样品类型都会以当前孔为起点进行填充， 可以用鼠标选择当前孔的位置； B、样品类型有以下几种：Blank、Calibrator、Control、Empty、Unknown ， 可以通过下拉菜单进行选择； C、如已选择 Calibrator，则需要设定标准品的浓度梯度，Concentration 为起始浓度，Unit为单位，如 mg/mL 或 mM，勾选 Generate series，进入下一对话框； D、如图，假设起始浓度为 1.0，浓度梯度选择除法，依次稀释10倍 ，共8个样品，每个样品重复2次。也可以用+、-、*等梯度方法。还可以在Multiple values处依次输入浓度值后点击 Add 添加即可； E、点击 OK 后得到下图。如果鼠标落在定义好的孔上，会显示孔的类型，及标准品浓度； F、Unknown 的设定类似，如设定数量（20个样品）和2个重复样品后得到下图： G、Blank 设定较为简单， 设定一下数量即可得到下图； 3、各个板孔设置编辑完成后，即可设置试验方法：点击 后在Steps 中添加实验方法和步骤。 方法是按鼠标右键调用步骤清单，或直接点击左边相应的方法图标。具体以下三种实验方法： A、光吸收检测 B、荧光检测 C、化学发光检测 4、全部设置完成后点击左上的存盘键 保存程序，点击出板键 ，待仪器自动移出托盘架后放入微孔板，放板前，请确认适配器与所使用的微孔板类型相符，去掉板盖，将微孔板的A1孔对准托架左上角A1位置，点击进板键 ，点击运行键 ，仪器自动移入托架并开始检测。 5、检测完成后，选中 ，然后点击Report ，在Select items to report中选中要导出的内容，点击Add到Report items中，点击View Report 点击 View Report 后切换到 Report 面板，对导出结果进行浏览。按保存，填入文件名称（File name），选择文件类型（.xls 或.pdf 或.txt），一般保存结果至 Excel 文件。 A、光吸收检测 1、如果已知最佳比色波长，点击Photometric Measurement 光吸收检测，在Paramenters处设置参数，在Wavelength中输入检测波长（单波长检测时），也可以设置多波长检测，勾选Multiple measurements，然后依次输入波长，依次点击Add： 2、如果不确定最佳比色波长，可以先进行光吸收光谱扫描Photometric Scanning ，仪器将从设定的起始（Start）波长，每次递进（Step size）扫描到结束（End）波长。注意普通的酶标板对于 300nm 以前的紫外光有很强的吸收，如果被检测物质（如核酸）的最大吸收峰在 300nm 以前，请选购紫外板或石英板。 荧光检测： 1、如已知最佳激发波长与发射波长，点击Fluorometric Measurement 进行荧光检测： A、检测悬液时选择Top荧光顶读，Excitation Wavelength中输入激发