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现代 医药卫生20o8年 24卷第 24期 3671
1.1.1 瑞 氏一姬姆萨复合染液 :瑞氏粉 1g,姬姆萨粉0.5g,甘 染液+磷酸盐缓冲液染色后镜检观察有无骨髓特异成分 (如骨
油15IIll,甲醇500Illl。混匀。 髓小粒 、巨核细胞 、白血病细胞 、幼红幼粒细胞等)来判断骨髓
1.1.2 磷酸盐缓冲液(pH6.4—6.8)磷酸二氢钾0-3g,磷酸氢二 取材情况的准确率为100%,这方法准确率高 ,为通用方法 。但
钠0.2g,再加蒸馏水至l000ml。 所需染色时间较长 .并且其影响因素较多,如染液性能、浓度 、
1.2仪器 :普通光学显微镜 。 片膜厚度 、温度 、染液的量 、染液和缓冲液比例及操作者的熟练
1.3 方法 :对我院2006~2007年10o例骨髓穿刺患者 由I临床医 程度等 。常规染色至少也需要5—20分钟翻。在瑞 氏一姬姆萨复合
生按常规操作行髂骨穿刺取骨髓液0.2加.5ml,由细胞学室人 染色法 中加磷酸盐缓冲液早在1920年 已提 出,并沿用至今 。近
员用清洁玻片按推片法制作髓片(要求片膜厚薄适宜 、头体尾 年来国内好一些实验室采用蒸馏水代替磷酸盐缓冲液 。均可染
分 明、分布均匀、边缘整齐、两侧留有空隙)。各备片3张,分别编 出合格 的涂片131。C组是在加有瑞氏一姬姆萨复合染液 的髓膜上
号分为3组 :A组 :直接肉眼观察髓膜上有无骨髓小粒(特别是片 不加缓冲液、蒸馏水,而是向其哈一 口气代替 ,并立即流水冲
尾和两侧);B组 :按如下步骤进行瑞氏一姬姆萨复合染液+磷酸 洗 、吸水纸吸干 ,镜检观察所染髓片也能较清晰地识别骨髓特
盐缓冲液染色 :(1)加瑞 氏一姬姆萨复合染液2—5滴与片膜上 ,固 异成分 (如骨髓小粒、巨核细胞、自血病细胞 、幼红幼粒细胞
定O.5一1分钟 ;(2)滴加等量或稍多的磷酸盐缓冲液 ,与瑞 氏一姬 等),这方法 的准确率为100%,所需染色时间仅需数秒钟即可 。
姆萨复合染液混匀,染色5~l0分钟 ;(3)用流水从片膜一侧缓缓 此方法操作简单 .只需少量瑞 氏一姬姆萨复合染液 ,不加磷酸盐
冲掉染液 (勿先倒去染液),待干 ,镜检观察有无骨髓特异成分 ; 缓冲液或蒸馏水 ,节约了成本。并且大大缩短了穿刺医生等待
C组 :向只加有瑞 氏一姬姆萨复合染液的髓膜上哈一 口气 .立 即 报告 “穿刺成功与否”的时间,提高了工作效率 ,极大地缓解 了
流水冲洗、吸水纸吸干 .镜检以观察髓膜上有无骨髓特异成分 病人的焦虑情绪并减轻了病人的痛苦 。瑞氏一姬姆萨染液是 由
(如骨髓小粒 、巨核细胞、白血病细胞 、幼红幼粒细胞等)。 酸性染料伊红和碱性染料美兰组成的复合染料 ,染色既有物理
的吸附作用 。又有化学的亲和作用。各种细胞和细胞的各种成
2 结果(见表1)
分化学性质不同.对各种染料的亲和力也不一样 。例如血红蛋
白、嗜酸性颗粒为碱性蛋 白质 ,与酸性染料伊红结合 ,染粉红
表1 不 同方法判断骨■取材情况
色 ;细胞核蛋 白和淋 巴细胞浆为酸性,与碱性染料美兰或天青
结合 ,染浅蓝色或紫色:中性颗粒呈等电状态 ,与伊红和美兰均
可结合染紫红色。细胞 的各种成分均为蛋 白质构成 ,由于蛋 白
质系两性 电解质 ,所带 电荷随溶液pH而定 ,在偏酸性环境 中正
电荷增多,易与伊红结合 ,染色偏红;在偏
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