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第 28卷第 4期 中学生物学 V01．28No．4 2012正 MiddleSchoolBiology 2012 文件编号：1003—7586(2012)04—0005—02 基因工程中限制酶切割的几个问题 张玉林 (江苏省江阴市长泾中学 江苏无锡 214411) 限制酶全称限制性核酸内切酶，能识别并切割具 后，限制酶就不能再降解这种DNA了，所以限制性内 有特异序列的双链DNA分子，主要从原核细胞中分 切酶只降解外源入侵的异种 DNA，而不分解 自身 离纯化而来，迄今为止，已分离出来的限制酶约有 ．DNA，在消解外源DNA遗传干扰的同时又保护了自 4000余种。作为基因工程中非常重要的一种工具，它 身遗传特性的稳定。 应用广泛，是历年高考中能力题的命题着力点，但由 2 一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 于书本相关内容介绍简单，而考试命题时常有所拓 吗 展，很多师生在解答此类题 目时常发生认知冲突，产 在人教版 《生物 必·修 2·遗传与进化))P102中，明 生很大的困惑，为此 ，笔者总结了教学过程中的一些 确指出：“一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序 问题，供大家参考。 列，并在特定的切点上切割DNA分子”，但真实情况 H n d 1 限制酶能将外来的DNA切断。使之失去活力。对 却并非如此，有少数限制性核酸内切酶可以识别两种 Ⅱ 自己的DNA却无损害作用的原因 以上的核苷酸序列。如 HindII的识别序列为 5… ，5 ，5 ，5 ，5 ，5 在人教版 《生物 ·必修 2·遗传与进化》中，关于 “T2 GTPyJ，PuAC…3，其中Pv=c或T；Pu=A或G。这样 ● ● ● ● ● 噬菌体侵染细菌”的实验就已经告诉我们，原核生物 HindII的识别序列实际为四种，如图1所示。 、 伽凹凹凹 C C T T 容易受到 自然界外源DNA的入侵 ，这一点学生很容 PuAC…3’ (简并序列) A AC…3 易理解并接受，但对于原核生物细胞内的限制酶只切