高效液相色谱法测定酒花－酸含量.pdf

高效液相色谱法测定酒花 -酸含量 陈家华 沈礼兵 上（海进出口商品检验局 上海 200002） 提 要 介绍反相液相色谱测定酒花和酒花浸膏中的 -酸含量的方法，反相色谱分离 -酸，外标法定量。方法 具有样品处理简单、快速、定量准确和重复的特点。酒花和酒花浸膏的 -酸测定相对偏差分别为2.02％和 1.78％。 关键词 高效液相色谱法，啤酒花，啤酒花抽提物，酸 分类号 O658 溶液：将1.0000g标准酒花抽提物用甲醇定量溶于 1 前言 100mL棕色容量瓶中，置5℃下备用。酒花标准贮 啤酒花学名蛇麻 （LumpulusL，又名Hop），主 备溶液：1g/L，移取5mL酒花标准贮备溶液置于 要作为啤酒酿造工业原料，在啤酒中起苦味、呈香、 50mL棕色容量瓶中，用 甲醇定容至刻度，置5℃下 备 用 。 防腐 和 澄吻清 麦 汁 的 作 用 。 酒花的最主要成分是酒花树脂，酒花树脂含 - 2.2 仪器和器皿 酸与 β酸。-酸具苦味和抑菌防腐能力。但 -酸极 Waters液相色谱仪，510型 或（相当的液相色谱 易异构化成异 酸，它是一种不稳定的物质。目前 仪），备有U6K进样器、490E紫外检测器、450 数 国际贸易以酒花 酸含量衡量酒花酿造价值，啤酒 据处理仪。摇床，天平，感量0.001g；容量瓶，50 酿造工艺以 -酸含量确定酿酒时酒花添加量[1]。所 mL,100mL；锥瓶，250mL;0.45μm滤膜。 以酒花贸易以 -酸含量结价。为此测定压缩酒花、 2.3 实验步骤 颗粒＞苹ㄖ中泻和酒花浸膏嘀中械的摩 酸岷含量考 匾 2.3.1样品反处理 对压缩酒花、颗粒酒花中和酒花浸膏中的 -酸 1（）颗粒酒花 或（压缩酒花）：将颗粒酒花或（压 含量测定的经典方法，欧洲啤酒协会 简（称EBC）和 缩酒花）粉碎成粉末状，准确称取10.0g样品精（确 我国国家标准都采用电导滴定和紫外分光光度法， 至0.001g)置于250mL锥形瓶中，加入20mL甲 其中紫外分光光度法是国际贸易普遍采用的仲裁方 醇，100mL乙醚，盖上瓶塞，置于摇床上振摇30 法[2]。由于电导法和紫外法是非选择性方法，测定时 min，加入40mL,0.1mol/L盐酸，再振摇 10min， 会受到酒花中其它物质的干扰，操作也繁杂费时，所 静置分层。用吸管吸取1mL上清液置于10ML容 以酒花分析工作者研究用薄层色谱[3]离子色谱[4] 量瓶中，用N2气吹去乙醚，恰好至干。在容量瓶中加 测定酒花的 -酸含量。近年人们还尝试用高压液相 入甲醇，溶解残渣，用甲醇定容至刻度，混匀，过 色谱法测定酒花中的 -酸含量[5～7]。本文介绍我们 0.45μm膜，供HPLC测定。 研究的测定酒花中 -酸含量的液相色谱法。本法具 2（）酒花浸膏：准确称取0.5g样品 精（确至 有样品预处理简单、快速，定量准确、重复的特点。 0.001g）置于烧杯中，加入甲醇溶解，将溶液定量转 移入100ML容量瓶，加入甲醇定容至100mL，移取 2 实验部分 10mL溶液置于50mL容量瓶中，用甲醇定容至50 mL。混匀，过0.45μm膜，供HPLC测定。 2.1 试剂和材科 2.3.2 色谱条件 水为超纯水，甲醇，紫外光谱纯；乙醚，分析纯； 色谱柱：Z-moduleμ-Bond