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中国猕猴属进化分析及物种特异性遗传标记的分析
独创性声明
本人声明,所呈交的学位(毕业)论文,是本人在指导教师的指导下独立完
成的研究成采,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作
了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本
研究做必贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯
他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。
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论文使用授权的说明
本人完全了解福建农林大学鸯关保留、使用学位(毕业)论文的规定,帮学
校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或
部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。
保密,在 年后解密可适用本授权书。 口 ,
不保密,本论文属于不保密。 v./
学位(毕业)论文作者亲笔签名:微’删 隰洲·参·力。
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镬建袁髂土季壤士学霞论文
中文摘要
对野外调查和保护执法工作中获德的猕猴属动物疑似样品进行物种鉴定时,
往往是恧对污染、腐败、残缺不全(如毛发、骨骼、蹄甲、脏器、肌肉纤维等)
或极微量的检材,难以检查辨认。建立对我国猕猴属物种(特别是微量组织)进行
分子检测的灵敏、精确、可靠的方法,解决我国猕猴属5个物种的分子生物学鉴
定技术问题是十分有意义的。
试验一:参照人类和猕猴cytb基因两端序列设计合成引物对Ca、Cs,对猕
猴属2个物种熊猴和豚尾猴的cytb基因进行扩增,并将扩增片断测序,测得cytb
基因全长1140bp的片断序列(其中豚尾猴的基因登陆号是:剐204975)。利用
DNAstar软件进行比对,构建猕猴属系统进化树,进行遗传进化分析,并为其物
种的分子鉴定奠定基础。
试验--:从Genbank下载的7种常见的物种、猕猴属5个物种及同科相近属、
同目相近科lO个物种的cytb基因序列,利用DNAstar软件进行种间序列比对,寻
找猕猴属5个物种的保守突变位点,然后再根据引物设计有关原则,设计合成对
该属物秭的一对特异性引物:溉、箍s。用该对弓|物对从l簖{l近源物种和7种常见
物种的肌肉、毛发或粪便中提取的总DNA或mtDNA的细胞色素b段进行PCR扩增,并
对其特异性、敏感性和重复性进行了验证。结果表明,引物姚、Ms对我国猕猴属
物种DNA特异,即在PCR反应时,该引物只能特异地扩增猕猴属物种DNA,而对一
些常见物种及近源物种的DNA不能扩增,经验证检测正确率10096,表明了本方法
稳定、灵敏、可靠。从而达到对猕猴属微量组织鉴定的目的,建立了猕猴属5个
物种的分子生物学查验和实验室确证方法。为野外调查中获得的猕猴属动物的残
余物及其部分微量样品的查验提供了便捷、可靠的检测手段。
比对猕猴属5个物种cytb基西痔列,寻找各物种的保守突变点,并根据这些
突变,利用Primer5.O和Oligo6.O软件设计各物种的特异引物,然后对其特异
性、敏感性和重复性进行了验证,并对PCR条件进行了优化。验证结果表明:各
猕猴属物种的特异引物对相应物种的DNA能特异PCR扩增,即在PCR反应时,引物
只能分别特异地扩增相应物种的DNAN的片断,而对猕猴属其他物种的DNA不能扩
增,经验证检测正确率10。%,表明本方法稳定、灵敏、可靠。从而达到对猕猴属
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福建农林大学磺毋学位论文
5个物种微量组织鉴定的因的,建立了猕猴瘸5个物种分子生物学查验和实验室检
验的方法。为野外调查中获得的猕猴属动物的残余物及其部分微量样品的查验提
供了方便、可靠的检测手段。
关键词:猕猴属;物种鉴定:cytb基因;特异性PCR
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褥建豢橡走学霞尝学叠论文
Abstract
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