不同预孵时间对ELISA抗-HIV和抗-HCV实验结果的影响探讨.pdfVIP

· 2 · 柳州医学 2012年第25卷第 1期(总第96期) 不同预孵时间对ELISA抗一HIV和抗一HCV实验结果的影响探讨 罗保红 刘振北 周仲 民 刘峭梅 广西壮族 自治区血液中心 柳州 545005 【关键词】酶免分析仪；预孵时间；人类免疫缺陷病毒抗体；丙型肝炎病毒抗体 【中图分类号】R．392-33 【文献标识码】B BEPIII全 自动酶免分析仪走进实验室 ．对实验室的实 1．2 设备与试剂 验效率和实验质量都是质的提升．减少了由于人工操作所 RSP200全 自动加样器(瑞士 TECAN公司)；BEPIII酶 造成 的误差 。但是 。笔者在实验 中发现 ，BEPIII在同时处理 免分析仪(德 国德灵公司)：抗一HIV和抗一HCV ELISA试 多块酶标反应板实验时．常出现 “堵车 ”现象．从而使 ELISA 剂盒 (北京万泰药业有限公司，批号分别是 120050404。 酶标反应板在预孵室Cg温)中滞留了不等时间后才能正式 ；2NCU／ml抗一HIV质控血清 (卫生部临检 中 进入孵育室 (37℃)。笔者通过实验对滞 留时间(即预孵时 心)；2NCU／ml抗一Hcv质控血清 (上海血液 中心)。 间)的增加可能造成 ELISA实验结果受到的影响进行探 1．3 方法 讨 ，结果报告如下。 试剂盒放室温 中平衡 30min．同时．为 了减少板 间差 1 材料与方法 异 ．实验时用同一批号，并且分拆同一板 的包被条来检测 同 1．1 受检标本 一 份标本和 阴、阳性对照及质控血清。然后 ．用 同一台 1．1．1 抗一HIV标本 6份 1份 阴性标本 (用阴性献血员的 R．SP200把这 72个标本加到这 5块 ELISA抗一HIV酶标反 血清混合成)；1份弱阳性标本 (用阴性献血员的血清加入 应板 中，分别放置室温 中0min (即正常)、15rain、30min、 阳性标本配成)；1份阳性标本 (用阳性献血员的血清混合 45min、60rain之后再进入 同一 台BEPIII进行检测 。抗一 成)；1份阴性对照 (用抗一HIV试剂盒阴性对照混合成)；1 HCV的检测方法类同。当时实验室温度是 23~(2。湿度是 份阳性对照(用抗一HIV试剂盒阳性对照混合成)；1份质控 68％。 血清 (用2NCU／ml稀释成低 OD值血清)。然后 ，前 3份标 1．4 统计分析 本分别平行分装到 16支试管中．后 3份则分别平行分装到 采用PEMS3．1医学统计软件的两样本均数比较的c 8支试管中。 检验或 tI检验 1．1．2 抗一HCV标本 6份 1份 阴性标本 (x16)；1份弱 2 结果 阳性标本 (x16)；1份 阳性标本 (x16)；1份 阴性对照(x 2．1 ELISA抗一HIV酶标反应板在室温是 23~(2．湿度是 8)；1份阳性对照(x8)；1份 2NCU／ml质控血清(x8)。其 68％的条件下．放置不同时间后进人 BEPIII的检测结果及 配制方法与抗一HIV标本类同。 比较 ，结果见表 1。 表 1 ELISA 抗一HIV检测结果(s／co)及 比较 ( is) 注：▲表示②③④⑤与①比较P0．05；★表示③④⑤与②比较P0．05 2．2 ELISA抗一HCV酶标反应板在室温是 23~C，湿度是 比较，结果见表 2。 68％的条件下．放置不 同时间后进入 BEPIII的检测结果及 柳州医学 2012年第 2‘5卷第 1期(总第96期) · 3 ·