大鼠胚胎干细胞的研究进展.pdfVIP

ournalofTropicalMedicineVo1．8No．10Oct．2008 J — — I文章编号】 1672—3619(2008)10一I100—04 · 综 述 · 大鼠胚胎干细胞的研究进展 刘蓉 ，张薇 ，张玉芳 ，郭中敏 (1．中山大学北校区实验动物中心．广州 510080) (2．新疆巴州动物疾病控制与诊断中心，巴州 841900) 摘【要】胚胎干细胞是来源于早期胚胎内细胞团或着床后胚原始生殖细胞的一类未分化的全能性 (多能 性)干细胞，具有无限增殖和全向分化的能力。ES细胞能够 自我更新和多向分化的生物学特性具有重要的医学 价值 ，在基因治疗、组织工程学、药学研究等许多领域都具有广泛的应用前景。至今为止人类已建立了数百个小 鼠的ES细胞系。但相对大鼠而言，由于其 Es细胞在体外培养时较易发生分化，故建系较难 。Iannaccone等从大 鼠PVG近交系大鼠的囊胚分离克隆了大鼠ES细胞系一RESC．01。本文主要综述了目前分离、培养大鼠胚胎干细 胞的技术进展 ，我实验小组在预实验中得到的结果及面临的问题 ，讨论其在临床工作中的应用前景。 【关键词】胚胎干细胞；大鼠；囊胚 中图分类号：R392．2 文献标识码：A 由延迟着床的小 鼠囊胚内细胞团 (innercellmass． 也有影响。Evans认为分离ES细胞必须在十分精确的时间 ICM)分离得到胚胎干细胞 (embryonicstemcells，ES细胞)， 内进行 ，而延迟着床的囊胚正处于这一最佳时期。可能是 具有发育的全能性或多能性 ．同时可进行无限增殖、冷冻 由于胚胎延迟着床增加了未分化细胞的增殖时间，提高了 保存及基因遗传操作。由于ES细胞在体外可以定向诱导 建立 Es细胞系的效率 ，其成功率达47．7％，但建立的细胞 分化 ，并可用于制备嵌合体和生产克隆动物 ，所以该细胞 系是否易分化不明E33。桑椹胚在体外培养中形成的囊胚也 在基因遗传修饰 、人体发育、器官移植 、细胞治疗 、药物开 可用于 ES细胞的分离 ，与直接培养囊胚无显著差异 。 发等基础研究和临床治疗方面都有应用前景。大鼠应用于 Eistetter[]认为离散小 鼠早期胚胎桑椹胚成的卵裂球 (16 生命研究的各个领域 ．尤其在肿瘤学、药理学、内分泌学、 22个细胞)用来分离 ES细胞，较直接培养囊胚或桑椹胚 营养学方面应用最为广泛。Es细胞可广泛应用于嵌合体 效果好 。可能由于桑椹胚处于较早期发育阶段分化程度较 的制备 。克隆动物的生产。利用分子生物学技术对ES细胞 低 ，同时去除了滋胚层的分化诱导作用。Iannaccone等[5]从 进行遗传操作，可生产遗传修饰型细胞。遗传修饰型ES细 大 鼠PVG近交系大鼠的囊胚分离克隆大鼠Es细胞系一 胞可用于转基因动物的生产、人类遗传病动物模型的创建 RESC一01。 以及研究基因在生物发育过程中的作用。 1．2 脱透明带和去除滋养层细胞 在获取早期胚胎 ICM的过程中．可去除透明带后进 1 胚胎干细胞收集的研究