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酶蛋白的化学修饰 张显波）周加才） 严晓文）李 楠） 酶作为生物催化剂，其作用不言而喻。 但是大多数酶是蛋白质，其理化性质与其他 蛋白质类似，而其作用条件往往有很多限制。 化学修饰酶的目的主要用来研究酶的结构与 功能的关系，在理论上为之提供实验依据。 酶化学修饰人为改变酶的某些性质，创造天 然酶所不具备的某些优良特性甚至是创造出 新 的 活 性 ， 扩 大 酶 的 应 用 范 围 。 一、影响酶蛋白功能基反应性的因素 1. 微区的极性 2. 氢键效应 3. 静电效应 4. 位阻效应 二、酶蛋白功能基的超反应性 超反应性指的是蛋白质的某个侧链基 团与个别试剂能发生非常迅速的反应。 多数蛋白质的功能基与简单氨基酸中的 同样基团相比，反应性要差。 三、修饰剂反应性的决定因素 1. 选择吸附 2. 静电相互作用 3. 位阻因素 4. 催化因素 5. 局部环境的极性 四、修饰反应专一性的控制 五、修饰程度和修饰部位的测定 六、化学修饰结果的解释 七、功能基的化学修饰 1 羧基的化学修饰 几种修饰剂与羧基的反应如下三式所示，其中水溶性的碳二亚胺类 特定修饰酶的羧基已成为最普遍的标准方法，它在比较温和的条件 下就可以进行。 R O N O NHR O NHR ENZC O+ C + H pH5左右 ENZC O C HX ENZC X + O C N NHR NHR H R CH3 O O pH5左右 ENZ C O + OBF ENZ C OCH3 + CH OCH + BF 4 3 3 4 H C CH3 3 硼氟化三甲烊盐 O O HCl浓度0.02~0.1mol/L ENZ C OH + CH OH ENZ C OCH + H O 3 3 2 o 0~25 C 2 氨基的化学修饰 赖氨酸的ε-NH 以非质子化形式存在时亲核反应活性很高，易被选择性 2 修饰，可用的修饰剂也很多。氨基的烷基化是一种重要的赖氨酸修饰方法， 修饰剂包括有卤代乙酸、芳基卤和芳香族磺酸。在硼氢化钠等氢供体存在下 酶的氨基能与醛或