蛋白质合成的过程 - 西安电子科技大学生命科学技术学院.ppt

核定位序列NLS的特点 带正电荷的肽核心 短的富含碱性氨基酸的序列 能与入核载体作用，将蛋白质运进细胞核 与前导肽的区别 由含水的核孔通道来鉴别 入核信号是蛋白质的永久性部分，并不切除 52 核定位蛋白的运转机制 核运转因子α β 核定位蛋白的可溶性受体 54 细菌中蛋白质的跨膜运转 新翻译产生的蛋白质和分子伴侣SecB结合 新生蛋白-SecB被运送到细胞膜运转复合物SecA-SecYEG上 SecA嵌入膜中 带动部分新生蛋白 SecA变构 SecA再嵌入膜中 带动部分新生蛋白 六、蛋白质的修饰、降解与稳定性研究 泛素化修饰介导的蛋白质降解 蛋白质的SUMOylation 蛋白质的NEDDylation 蛋白质的一级结构对稳定性的影响 55 泛素化(ubiquitination)即蛋白质被泛素(ubiquitin，由76个氨基酸组成的多肽）共价修饰的过程，在几乎所有的真核细胞活动中起着关键作用。泛素 –蛋白酶体(proteasome)通路则是真核细胞内最主要的蛋白质降解途径。泛素化调控的细胞活动至少包括:  细胞周期、 细胞凋亡、转录调控、DNA修复、免疫应答、蛋白质降解及质量控制     泛素化修饰介导的蛋白质降解 E1 -E1 E2 -E2 目的蛋白 E3 ATP AMP+PPi Ub Ub Ub 　蛋白酶体 泛素－蛋白酶体通路 Ub: 泛素 (Ubiquitin)，一高度保守的，由76个氨基酸组成的多肽。 E1: 泛素激活酶 (Ubiquitin-activating enzyme)，人类仅有2种E1。 E2: 泛素载体蛋白 (Ubiquitin-carrier protein)， 人类约有 30 种E2s。 E3: 泛素－蛋白连接酶 (Ubiquitin-protein ligase)， 人类有500多种E3s 。 蛋白质的SUMOylation SUMO： small ubiquitin-related modifier 小泛素化相关修饰物 98个氨基酸，进化上高度保守，与泛素有18％同源性 SUMOylation修饰也需要E1, E2, E3的参与 SUMO阻碍泛素对底物蛋白的共价修饰，提高了底物蛋白的稳定性。这点与泛素介导的蛋白质降解不同。 蛋白质的NEDDylation NEDD： neural precursor cell-expressed developmentally downregulated NEDD8含有81个氨基酸，与泛素有59％一致性和80％相似性 NEDDylation修饰也需要E1, E2, E3的参与 NEDDylation不会引起底物蛋白的降解，而通过修饰来调节蛋白质的功能。这点与泛素介导的蛋白质降解不同。 NEDDylation异常会导致人类的神经退行性疾病和癌症 蛋白质的一级结构对稳定性的影响 蛋白质的半衰期与N端氨基酸残基的关系 N端残基 半衰期 稳定型残基 甲硫氨酸、甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸 缬氨酸 20 h 不稳定残基 异亮氨酸、谷氨酰胺 酪氨酸、谷氨酸 ~ 30 min ~ 10 min 脯氨酸 亮氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、赖氨酸 精氨酸 ~ 7 min ~ 3 min ~ 2 min * * fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 原核肽链合成终止过程 （四）肽链的终止 出现终止密码子 在核糖体的A位点时 释放因子结合密码子 水解P位上多肽链与tRNA 间的二酯键，多肽链释放， 大小亚基解离，蛋白质 合成结束 释放因子 释放因子 I类 能识别终止密码子，催化多肽链的解放 II类 刺激I类从核糖体解离 原核生物的释放因子 I类 RFI 识别UAG和UAA；RF2识别UGA和UAA II类 RF3 与核糖体的解离有关，能刺激RF1和RF2 活性 真核生物的释放因子 I 类：eRF1 能识别UAG UAA和UGA II类：eRF3 22 (五)蛋白质前体的加工 N端fMet或Met的切除：脱甲酰化酶 形成二硫键 特定氨基酸的修饰 磷酸化 –OH的反应 P137图4-21a 糖基化 膜蛋白和分泌蛋白 甲基化 细胞质机制内 乙酰化，泛素化，羟基化和羧基化等 25 切除非功能片段 新生蛋白质经蛋白酶切后变成有功能的成熟蛋白质 1、N端fMet或Met的切除 2、二硫键的形成 两个半胱氨酸-SH -SH -SH 二硫键 氧化 3、特定氨基酸的修饰 磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化 前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图 4、切除新生肽链中非功能片段 （六）蛋白质的折叠 所有新生