大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用.pdf

中国畜牧兽医 ， （）： ２０１７４４１ ２５４２６１ 　 犆犺犻狀犪犃狀犻犿犪犾犎狌狊犫犪狀犱狉 牔犞犲狋犲狉犻狀犪狉 犕犲犱犻犮犻狀犲 狔 狔 ： ／ ｄｏｉ１０．１６４３１ ．ｃｎｋｉ．１６７１７２３６．２０１７．０１．０３６ ｊ 大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用 ， １２ １ １ ２ ２ １ ２ 王华俊 ，刘 宇 ，蒋 薇 ，赵雪丽 ，曹伟伟 ，陈汉忠 ，闫若潜 　 　 （ 广西大学动物科学技术学院，南宁 ； 河南省动物疫病预防控制中心，郑州 ） １． ５３０００５２． ４５０００８ 摘 要：为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法，本试验利用抗大片形吸虫 抗原单 ＥＳ 　 克隆抗体杂交瘤细胞株 和 分别制备和纯化得到单克隆抗体 和 ；采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒 ７Ｄ１ ７Ｄ４ ７Ｄ１ ７Ｄ４ 大小为 ３０ｎｍ的胶体金，再用胶体金标记纯化单克隆抗体 ７Ｄ１，在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊 抗鼠ＩＧ二抗和单克隆抗体 ７Ｄ４，经反应条件优化，组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条 ｇ 对 抗原的检测下限为 ／ ，与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应，特异 ＥＳ ０．９４ ｍＬ μｇ 性好。采集广西地区３３４份水牛新鲜粪样并用试纸条检测，阳性率为 ３８．６２％。结果表明，试纸条方法操作简单、 快速、易于判定，特异性好，敏感性高，适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。 关键词：大片形吸虫；单克隆抗体；胶体金；试纸条 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５５．９ Ａ １６７１７２３６２０１７０１０２５４０８ 　　　　 　　　　 犘狉犲犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱犘狉犻犿犪狉犃 犾犻犮犪狋犻狅狀狅犳犐犿犿狌狀犻狋犆狅犾犾狅犻犱犪犾 狆 狔 狆狆 狔 犌狅犾犱犜犲狊狋犛狋狉犻犳狅狉犉犪狊犮犻狅犾犪 犻犪狀狋犻犮犪 狆 犵犵 ， １２ １ １ ２ ， ， ， ， ＷＡＮＧ Ｈｕａｕｎ ＬＩＵＹｕ ＪＩＡＮＧＷｅｉ ＺＨＡＯＸｕｅｌｉ ｊ ２ １ ２ ， ， ＣＡＯＷｅｉｗｅｉ ＣＨＥＮＨａｎｚｈｏｎ ＹＡＮＲｕｏｉａｎ