小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存 - 南京农业大学学报.pdf

摇 南京农业大学学报摇 2012,35(2):115-119 摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ / 試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試 剧世强,赵雪璠,张妍婷,等.小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存[J].南京农业大学学报,2012,35(2):115-119 小鼠-猪种间核移植胚胎玻璃化冷冻保存 剧世强,赵雪璠,张妍婷,孔妍,李建珅,芮荣* (南京农业大学动物医学院,江苏 南京210095) 摘要:以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以 猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护 液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。 结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与 猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P0.05)。 采用ES液作为冷 冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P0.05);与其他发育阶 段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率;小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组, 但无统计学差异(P0.05)。 结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行 OPS法冷冻保存, 可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低。 关键词:种间核移植;胚胎;玻璃化冷冻 中图分类号:S857.21摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2012)02-0115-05 Vitrification of embryos derived from mouse鄄pig interspecies nuclear transfer JU Shi鄄qiang,ZHAO Xue鄄fan,ZHANG Yan鄄ting,KONG Yan,LI Jian鄄shen,RUI Rong* (College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China) Abstract:The purpose of this experiment was to investigate the effects of different cryoprotectant (ES,EFS and EDFS)and developmental stages(2鄄,4鄄,8鄄cell)on viability of mouse鄄pig interspecies somatic cell nuclear transfer(iSCNT)embryos using open鄄 pulled straws(OPS method).Mouse cumulus cells were used for nuclear donor cells,and the in vitro maturated porcine oocytes were used asrecipients after enucleation.Mouse鄄pig iSCNT embryos were produced then and compared with the control of porcine somatic cell nuclear transfer(pSCNT)embryos.The results showed that mouse鄄pig iSC