第十章： 细胞增殖与调控.ppt

* * 分裂期周期蛋白N端有一段序列与其降解有关，称降解盒(destruction box)。当MPF活性达到最高时，通过泛素连接酶催化泛素与cyclin结合，cyclin随之被26S蛋白酶体水解。G1周期蛋白也通过类似的途径降解，但其N端没有降解盒，C端有一段PEST序列与其降解有关。 泛素由76个氨基酸组成，高度保守，普遍存在于真核细胞，故名泛素。共价结合泛素的蛋白质能被蛋白酶体识别和降解，这是细胞内短寿命蛋白和一些异常蛋白降解的普遍途径，泛素相当于蛋白质被摧毁的标签。26S蛋白酶体是一个大型的蛋白酶，可将泛素化的蛋白质分解成短肽。 （二）M期周期蛋白与分裂中期向后期转化 在蛋白质的泛素化过程中，E1（ubiquitin-activating enzyme，泛素激活酶）水解ATP获取能量，通过其活性位置的半胱氨酸残基与泛素的羧基末端形成高能硫酯键而激活泛素，然后E1将泛素交给E2（ubiquitin-conjugating enzyme，泛素结合酶），最后在E3（ubiquitin-ligase，泛素连接酶）的作用下将泛素转移到靶蛋白上。参与细胞周期调控的泛素连接酶至少有两类，其中SCF（skp1-cullin-F-box protein，三个蛋白构成的复合体）负责将泛素连接到G1/S期周期蛋白和某些CKI上，APC(anaphase promoting complex)负责将泛素连接到M期周期蛋白上。 蛋白质泛素化途径的裂解过程 细胞周期蛋白的降解盒与降解途径 泛素介导的周期蛋白降解 细胞周期中Cyclin B的合成与降解 （二）M期周期蛋白与分裂中期向后期转化 （三）G1/S期转化与G1期周期蛋白依赖性CDK激酶 G1/S期转化主要受G1期周期蛋白依赖性CDK激酶控制。周期蛋白包括：D(D1, D2, D3表达有组织、细胞特异性)、E、及A，激酶包括CDK, CDK4, CDK6等。 其中D与CDK4,CDK6结合；E，A与CDK2结合。 动物细胞控制 S 期起始的机制 CyclinD与CDK结合使Rb释放转录因子E2F Rb是G1期向S期转化的负调控因子 DNA复制还受到其它因素的调控 Orc复制起始位点识别复合体，含6个亚基，Cdc6和Cdc45是复制必须的调控因子 DNA复制的执照因子学说 因子M期与染色质结合，S期随DNA复制，信号减弱 Mcm蛋白（共六种）是主要成分。 六、其它内外因素对细胞周期的调控 P21cip1抑制CDK和PCNA DNA损伤抑制细胞周期的G1 丝裂原刺激细胞分裂的示意图 生长因子的作用机理 细胞周期的运行，是在一系列称为检验点（check point）的严格检控下进行的，当DNA发生损伤，复制不完全或纺锤体形成不正常，周期将被阻断。细胞周期检验点由感受异常事件的感受器、信号传导通路和效应器构成，主要检验点包括： G1/S检验点: 在酵母中称start点，在哺乳动物中称R点(restriction point)，控制细胞由静止状态的G1进入DNA合成期，相关的事件包括：DNA是否损伤？细胞外环境是否适宜？细胞体积是否足够大？ S期检验点：DNA复制是否完成？ G2/M检验点：是决定细胞一分为二的控制点，相关的事件包括：DNA是否损伤？细胞体积是否足够大？ 中-后期检验点（纺锤体组装检验点）：任何一个着丝点没有正确连接到纺锤体上，都会抑制APC的活性，引起细胞周期中断。 * * *