对丝腺细胞因子sgfr1具有调控作用的家蚕mirnas - 江苏农业科学.pdf

江苏农业科学　２０１６年第４４卷第３期 — ５３— 王　欣，陈　晨，范洋洋，等．对丝腺细胞因子ＳＧＦ－１具有调控作用的家蚕ｍｉＲＮＡｓ功能研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（３）：５３－５８． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０３．０１３ 对丝腺细胞因子 ＳＧＦ－１具有调控作用 的家蚕ｍｉＲＮＡｓ功能研究 １ １ １ １ １，２ １，２ １，２ 王　欣 ，陈　晨 ，范洋洋 ，谢雨辰 ，钱　平 ，唐顺明 ，沈兴家 （１．江苏科技大学生物技术学院／江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室，江苏镇江２１２００３； ２．中国农业科学院蚕业研究所，江苏镇江２１２０１８） 　　摘要：为了研究家蚕ｍｉＲＮＡｓ对丝腺细胞因子ＳＧＦ－１表达的调控作用，以ＳＧＦ－１为靶基因，利用生物信息学软 件ＲＮＡｈｙｂｒｉｄ和ＲＮＡ２２预测对ＳＧＦ－１具有潜在调控作用的候选家蚕ｍｉＲＮＡｓ，经茎环ＰＣＲ鉴定后分别构建重组表  达载体，在细胞水平研究家蚕ｍｉＲＮＡｓ的功能。结果表明，转染了ｂｍｏ－ｍｉＲ－３０５重组质粒组的ｌｕｃ荧光素酶活性比  未转染时极显著下调（Ｐ＜０．０１）；转染了ｂｍｏ－ｍｉＲ－３３２７重组质粒组的ｌｕｃ荧光素酶活性比未转染时极显著下调 （Ｐ＜０．０１）；再各自转染了ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ后荧光蛋白表达量均上调（Ｐ＜０．０５）。说明ＳＧＦ－１３′ＵＴＲ上存在ｂｍｏ－ｍｉＲ－     ３０５和ｂｍｏ－ｍｉＲ－３３２７ 的结合位点，且ｂｍｏ－ｍｉＲ－３０５和ｂｍｏ－ｍｉＲ－３３２７对ＳＧＦ－１的转录后表达具有一定 抑制作用。 　　关键词：家蚕；ｍｉＲＮＡｓ；丝腺转录因子；ＳＧＦ－１；功能鉴定 　　中图分类号：Ｓ８８１．２；Ｑ７８　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０３－００５３－０６ 　　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ（ｍｉＲＮＡｓ）作为重要的基因转录后表达调控 表达调控。通过计算机分析预测，Ｅｎｒｉｇｈｔ等指出在众多 因子，参与包括发育、代谢、疾病发生等各种重要的生理过程。 ｍｉＲＮＡｓ的潜在靶基因中，ＴＦｓ作为靶基因的可能性比一般基 ［８］ 目前国内外在家蚕ｍｉＲＮＡｓ上开展了相关研究，进行了家蚕 因大约高出２倍 。Ｃｕｉ等在研究基因调控中ｍｉＲＮＡｓ与 ｍｉＲＮＡｓ的鉴定、表达谱分析以及功能预测。至２０１４年６月， ＴＦｓ的相互关系方面也作出了贡献，认为ｍｉＲＮＡｓ更可能靶向 ｍｉＲＢａｓｅ数据库（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｉｒｂａｓｅ．ｏｒｇ／）２１版本中已记录 含有大量ＴＦｓ结合位点的基因，而这些基因通常也具有相对 ［９］ ２２３个物种的３５８２８条成熟体ｍｉＲＮＡｓ，并且其数量还在不断 更多的ｍｉＲＮＡｓ结合位点 。 ［１０］ 增长，其中，在家蚕中共发现４８７个ｍｉＲＮＡｓ前体和５６３个成 ＳＧＦ－１是丝腺特异性细胞因子 ，存在于中、后部丝 熟体ｍｉＲＮＡｓ。 腺。