电镜分析非晶状体βγ 晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物在人红细胞膜 .pdf

动 物 学 研 究 2008，Oct. 29(5)：503—510 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2008.05503 电镜分析非晶状体βγ晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物 在人红细胞膜上的孔道形成效应 刘树柏1, 2, #，何英英1, 2, #，钱金桥1, 2, 3，张 云1,* (1. 中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室，生物毒素研究室，云南 昆明 650223 ； 2. 中国科学院研究生院，北京 100049 ；3. 昆明医学院第一附属医院 麻醉科，云南 昆明 650032 ） 摘要：非晶状体βγ晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物(non-lens βγ-crystallin and trefoil factor complex，βγ-CAT) 是一个从大蹼铃蟾 (Bombina maxima) 皮肤分泌物中分离的天然分子量为72kDa 的全新的蛋白复合物。本研究测 定了 βγ-CAT 处理红细胞后引起细胞内钾离子外流与溶血效应的时效曲线，结合扫描电子显微镜和透射电子显微 镜分析 βγ-CAT 处理红细胞引起的早期形态学变化。结果表明：βγ-CAT(3 nmol/L)37 ℃处理红细胞 5 min ，（93.31 ±5.89 ）% 的细胞内钾离子迅速外流(P0.01) ，相应溶解率为（13.12±1.92）% (P0.05) 。电子显微镜观察发现红 细胞形态发生明显变化，细胞体积增加，肿胀。少数红细胞表面向外形成棘状异常突起，部分肿胀细胞内的血红 蛋白通过棘状突起缺口向细胞外喷射血红蛋白。表明 βγ-CAT 通过在红细胞膜上形成孔道使细胞内钾离子迅速外 流导致红细胞内渗透压改变而溶血。其结果为理解βγ-CAT 的溶血机制提供了直接的形态学证据。 关键词：三叶因子；非晶状体βγ- 晶状体蛋白；非晶状体βγ- 晶状体蛋白与三叶因子蛋白复合物；孔道形成蛋 白；扫描电子显微镜；投射电子显微镜 中图分类号：Q959.5 ；Q51 文献识码：A 文章编号：0254-5853-(2008)05-0503-08 Electron Microscopic Analysis of βγ-CAT Pore-forming Effect on Human Erythrocyte Membrane LIU Shu-bai1, 2, #, HE Ying-ying1, 2, #, QIAN Jin-qiao1, 2, 3, ZHANG Yun1, * (1. Biotoxin Units, Key Laboratory of Animal Models and Human Disease Mechanisms, Kunming Institute of Zoology, the Chinese Academy of Sciences, Kunming Yunnan 650223, China；2. Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China； 3. Department of Anesthesiology, the First Affiliated Hospital of Kunming Medical College, Kunming Yunnan 650032, China) Abstract: βγ-CAT is a naturally existing multifunctional protein complex of non-lens βγ