编号：生物农药研究中心[ 070512 ], 共6页 承担单位：福建省农科院生物 .doc

编号：[ 070512 ], 共页 承担单位：福建省农科院生物技术研究所 课题编号： 课题名称： 课题负责： 子课题名： 子课题号： 子课题人： 子项目名： 试验项目： 青枯菌伴生现象的初步研究 试验人员： 肖荣凤、唐秋榕、朱育菁 试验负责： 刘波、肖荣凤 报告日期： 2007-05-12 计数月份： 1月份 福建省农业科学院生物技术研究所 生物农药研究中心 电话: 0591 传真: 0591 1．试验目的 青枯菌（Ralstonia solanacearum）是引起细菌性青枯病的毁灭性土传病害可危害种植物，造成农林业生产巨大经济损失。青枯菌在寄主范围、地理分布、致病特征、流行特征、种下分化等方面存在较大的差异，具有明显的多态性。青枯菌存在着复杂的分化现象，菌落形态存在不同的分化现象。发现青枯菌 2．试验方法 2.1 供试菌株：青枯菌标准菌株GM1000（福大惠赠）及研究室保存的3个纯化后的番茄上分离的强菌株，菌株编号1100、1115和1118。 培养基：TTC固体培养基 主要仪器：JEM-100CXII/S透射电子显微镜 2.2方法 ℃培养60 h取出观察并统计纯落数，并按菌落不同弱化指数进行单菌落保存。 3．试验结果 图1 GM1000标准菌株透射电镜的菌体形态（10000倍） 正常青枯菌形态（实线所示）；疑是伴生菌（虚线所示） 图2 菌株编号1100透射电镜的菌体形态（10000倍） 正常青枯菌形态（实线所示）；疑是伴生菌（虚线所示） 图3 菌株编号1115透射电镜的菌体形态（10000倍） 正常的青枯菌形态（实线所示） 图4 菌株编号1118透射电镜的菌体形态（10000倍） 正常的青枯菌形态（实线所示） 3.2青枯菌原始菌株的超声波分离纯化分析 3.2.1超声波处理对菌体数的变化影响 超声波处理前后菌体变化的比值分析结果见表1。结果表明，一定浓度的菌体经超声波处理后菌体数量会略有减少，减少量约为16%-38%之间。 表1超声波处理与未经超声波处理的菌体变化的比值 菌株编号 超声波处理/未经超声波处理的菌体比值 GM1000 0.84 1100 0.81 1115 0.62 1118 0.75 3.2.1超声波处理前后菌体在TTC平板上分离纯化表现 试验结果见图5-12。超声波处理前后菌体在TTC平板上分离纯化结果表明，标准菌株GM1000、菌株编号1115和1118这3个菌株均获得了较纯的强菌落形态，仅表现在弱化指数的差异上。而菌株编号1100菌株超声波处理前后菌体在TTC平板上均出现两种差异较大的菌落形态（图7和8），一种为实线箭头所示的强菌株，一种为虚线箭头所示的弱菌株，说明菌体形态发生了生理分化现象。 图5 标准菌株GM1000 未经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图6 标准菌株GM1000 经超声波处理 左（平板正面） ； 右 平板背面 图7 菌株编号1100 未经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图8 菌株编号1100 经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图9 菌株编号1115 未经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图10 菌株编号1115 经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图11 菌株编号1118 未经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 图12 菌株编号1118 经超声波处理 左：（平板正面） ； 右：平板背面 4. 试验结论 参考文献