萝卜硫素对肺气肿大鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α 的影响.pdf

·2164 · 中华临床医师杂志( 电子版)2015 年6 月第9 卷第11 期 Chin J Clinicians(Electronic Edition),June 1,2015,Vol.9,No.11 ·基础论著· 萝卜硫素对肺气肿大鼠肺泡巨噬细胞 分泌肿瘤坏死因子α 的影响 1 1 2 1 1 1 任晓凤 邱亚林 王家璞 谢龙舟 李建强 赵卉 【摘要】 目的 探讨萝卜硫素（SFN）对肺气肿大鼠肺泡巨噬细胞（AM ）分泌肿瘤坏死因子 α （TNF-α ）的影响。方法 SPF级雄性Wistar大鼠18只，随机分为对照组（6只）和模型组（12只）： 模型组采用气管内滴注脂多糖（d1、d14 ）联合熏烟法构建肺气肿大鼠模型，持续60 d；对照组以生 理盐水替代脂多糖，正常空气吸入。造模成功后，两组大鼠均行支气管肺泡灌洗，支气管肺泡灌洗 液（BALF ）行细胞计数，提取、纯化AM ，用不同浓度SFN （0 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L） 干预模型组大鼠AM 16 h 。依处理方法不同，将AM分为五组：对照组、SFN0组、SFN5组、SFN10 组和SFN20组。采用ELISA法检测各组细胞培养上清液中TNF-α含量；蛋白印迹法（Western blot ）检 测各组AM 中核转录因子Nrf2及下游靶基因醌氧化还原酶1 （NQO1 ）、血红素氧合酶-1 （HO1 ）蛋白 相对表达量。结果 （1）模型组大鼠BALF 中细胞总数及AM 百分比均较对照组显著增加，分别为 6 6 （2.79 ±0.42 ）×10 /ml ，（98.7 ±1.0）%和（0.77 ±0.16 ）×10 /ml ，（90.0 ±2.5 ）% （均P ＜0.001 ）； （2 ）TNF-α在SFN各浓度组中含量均高于对照组[对照组：（12.2 ±2.7 ）pg/ml ；SFN0组：（150.7±11.0） pg/ml ；SFN5组：（133.1±13.7）pg/ml ；SFN10组：（65.3 ±14.8）pg/ml ；SFN20组：（48.2 ±11.1）pg/ml] ， 随SFN干预浓度增加，TNF-α含量呈下降趋势（均P ＜0.05 ）；（3 ）与对照组相比，SFN0组Nrf2 蛋白 胞核表达减少，胞质表达增加（均P ＜0.05 ），随SFN干预浓度增加，Nrf2胞核表达量相应增加，胞质 相应减少 （均P ＜0.05 ），即核内移增加；（4 ）与对照组相比，SFN0组NQO1 、HO1蛋白表达减少， 随SFN干预浓度增加，NQO1 、HO1蛋白表达相应增加（均P ＜0.05 ）。且NQO1 、HO1表达量与TNF-α 含量呈负相关（r －0.918，P ＜0.01 ；r －0.939，P ＜0.01 ）。结论 SFN可通过增加Nrf2核内移，促 进下游靶基因NQO1 、HO1等转录表达，进而抑制肺气肿大鼠AM释放TNF-α 。 【关键词】 肺疾病，慢性阻塞性； 巨噬细胞，肺泡； 肿瘤坏死因子α； 萝卜硫素 Effects of Sulforaphane on secreting TNF-α in the alveolar macrophage of pulmonary emphysema 1 1 2 1 1