家蝇幼虫抗真菌肽在不同条件下的结构与活性分析.pdf

· 124 · 中国热带医学 2014 年第14卷第11期 China Tropical Medicine ，November 2014 ，Vol. 14，No.11 实验研究 家蝇幼虫抗真菌肽在不同条件下的结构与活性分析 1 2 1 1 涂涛田 ，韩洁 ，季恒青 ，刘南 1. 重庆市疾病预防控制中心消毒与媒介生物控制所，重庆，400042 ；2.重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心，重庆，400042 摘要：目的 制备家蝇幼虫血淋巴中的抗真菌肽-1（Musca domestica antifungal peptide-1,MAF-1），对分离出的 MAF-1 进行结构与功能分析。方法 通过C18 柱固相萃取、反相高效液相色谱相（RP-HPLC）相结合的方法制备 MAF-1，通过圆二色谱和微量液体菌落计数法检测MAF-1在100℃30min、100℃1h 、2% SDS 溶液及5% SDS 溶液作用 条件下结构及活性变化的情况，进而探索MAF-1结构与功能的关系。结果 通过C18 柱固相萃取和反相高效液相色谱 相结合的方法成功分离制备出MAF-1；通过圆二色谱测出水溶液中MAF-1 主要以α螺旋及β折叠为主，无规卷曲的构 象也存在；随着物理方法煮沸和化学变性剂SDS 的加入，对MAF-1β折叠结构影响较大，其抑菌活性也相应降低。结 论 物理煮沸和化学变性剂SDS 对MAF-1 的二级结构和功能有一定的影响，具体机制有待进一步研究探索。 关键词 ：家蝇幼虫；MAF-1；圆二色谱 1009-9727(2014) 11-页码-页数 中图分类号：R384 文献标识码：A 文章编号： The structure and antifungal activity of Musca domestica antifungal peptide-1 from the hemolymph of Musca domestica larvae (housefly) in different conditions TU Tao-tian1 ,HAN Jie, JI Heng-qing, LIU Nan 1.Institute of Disinfection and the Control of Vector Biology, Chongqing Center for Disease Control and Prevention, Chongqing400042,P.R.China Abstract: Objective To investigate the structure and function of Musca domestica antifungal peptide-1 （MAF-1）of Musca domestica larvae. Methods MAF-1 was isolated and purificated by solid phase extraction (SPE) and RP-HPLC; The structure of MAF-1 was measured by Circular dichroism spectrum. The structure and function of MAF-