2016·高考仿真练 1．(2015·山东烟台一模)科学家将鱼抗冻蛋白基因转 .doc

2016·高考仿真练 1．(2015·山东烟台一模)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。下图一是转基因抗冻番茄培育过程的示意图，图二为质粒限制酶酶切图谱。鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列，Ampr为抗氨苄青霉素基因，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答： (1)为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的________之后。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的________________过程。 (2)在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点________。 (3)要利用培养基筛选出已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有________作为标记基因。 (4)研究人员通常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋 答案　(1)启动子　脱分化、再分化 (2)识别特定的DNA序列并在特定位点切割 (3)抗氨苄青霉素基因(Ampr) (4)农杆菌转化(或基因枪法等)　抗原—抗体 2．科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题： (1)过程①获得重组胚胎之前需要通过________技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于________ (2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的________，构建之前可以利用________技术对目的基因进行扩增。 (3)将基因导入ES细胞常用的方法是________，体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的________。 (4)为检测干扰素基因的表达情况，可采用________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。 答案　(1)核移植　MⅡ　(2)内细胞团　(基因)表达载体　PCR　(3)显微注射法　全能性　(4)抗原—抗体杂交 3．(2015·山东淄博模拟)农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程，请据图作答： (1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中________处理DNA以防止DNA片段的自身环化，需用________“缝合”双链DNA片段的平末端。 (2)目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些________。由过程②形成的运载体中，目的基因的首端具有________识别和结合的部位。 (3)过程③常用________处理使农杆菌成为感受态细胞。在过程⑤⑥前，常采用________技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因及转录产物。 4)过程④需对植物细胞做冲洗和________处理，然后用________去除细胞壁。 答案　(1)多种限制酶　T4DNA连接酶　(2)具调控作用的因子　RNA聚合酶　(3)Ca2＋(CaCl2溶液)　核酸分子杂交(基因探针)　(4)消毒　纤维素酶(和果胶酶) 4．(2015·江苏宿迁联考)由于人突变细胞中含胸苷激酶(TK)而缺乏HGPRT酶，小鼠正常细胞HGPRT酶而缺乏TK，两种细胞均不能在HAT培养基中生长，但可在普通培养基中生长。利用上述两类细胞融合获得杂种细胞，在杂种细胞传代过程中，鼠的染色体被保留下来，人的染色体随机丢失，以至最后只剩一条或几条人染色体(如下图，图中数字代表保留的人染色体编号)。科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体。分析回答： (1)人、鼠细胞融合的原理是________。与植物原生质体融合过程相比，过程A特有的诱导方法是________。 (2)动物细胞培养过程中，培养液中添加一定量的抗生素的目的是________，培养箱中充入5%的CO2气体的主要作用是________。 (3)过程B用HAT培养基进行培养，目的是__________________________________。 (4)为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中，人鼠融合细胞应在________(填“HAT”或“普通”)培养基中传代培养________(时期)的杂种细胞进行观察。 (5)若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养，一段时间后，发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长，检查杂种细胞中保留的人染色体情况如下表(表中“＋”表示有相应染色体，“－”表示无相应染色体)： 杂种细胞 保留的人染色体 2号 3号 5号 9号 12号 17号 21号 A ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ － B － ＋ －