lcq fleet 型液相色谱-质谱联用仪操作规程.pdf

LCQ Fleet 型液相色谱-质谱联用仪操作规程 一、开机与关机 1. 开机前，先检查氮气和氦气的压力是否满足分析要求。打开氦气钢瓶（纯度99.995% ） 压力表总阀，调节分压表到 0.15MPa。打开氮气钢瓶（纯度99.9% ）压力表总阀，调节分 压表到 0.4~0.6MPa。 2. 打开 FCQ Fleet 总电源开关，机械泵开始工作。此时勿打开电子开关。在此状态下抽真 空 24 小时。 3. 抽完真空后，打开电子开关。取下离子源，取下用于密封的 APCI 电晕针并保存好，再 装上离子源。 4. 关机：关机顺序与开机顺序相反，无特殊情况或长假，质谱仪不关机。 二、日常开机（机械泵未关闭时） 1. 开机前的准备工作 1.1 检查设备电源、流路、信号连接是否完好。 1.2 流动相：必须使用色谱纯的溶剂，若是选用进口的色谱纯试剂可以不经过微孔滤膜过滤， 以免引入增塑剂等杂质。水或缓冲盐溶液要用新鲜制备的超纯水，经 0.45um 微孔滤膜抽真 空过滤。夏天温度较高时，纯水或缓冲盐尽量每天更换，以免长菌。 1.3 流动相添加剂：不要使用无机酸、碱金属碱，它们会导致仪器腐蚀，推荐使用易挥发的 有机酸和有机碱，如醋酸、甲酸、氨水等。表面活性剂易产生离子抑制作用，因而清洗用于 液质的样品瓶等不要用洗涤精等表面活性剂。 2. 开机 2.1 先打开氮气总阀，慢慢调节分压表到 0.5MPa。 2.2 依次打开 FCQ Fleet 主机上的电子开关、高效液相色谱仪、自动进样器和 计算机。 2.3 仪器各部分开始自检。黑色的 自检窗口显示质谱自检状态，待仪器显示待 机状态时， 仪器才可以正常使用。 2.4 打开计算机桌面上的“Instrument configuration”软件，对仪器进行配置。具体方法如下： 选择 LCQ Fleet MS 选项，选择 configure ，选择MS Detector ，点击OK ；选择 Dionex Chromatography MS Link ，选择configure ，点击 OK ；点击 Done 选项，仪器开始配置。 2.5 打开计算机桌面上的“Chromeleon Xpress”软件，选择 take over control ，对高效液相色 谱仪进行控制。设定流动相比例，打开 Purge 阀，在 More Options 中选择 Purge 操作，对 液相色谱中的管路进行排气。5min 后排气结束，关闭 Purg 阀，设置流动相流速为 0.2ml/min ， 稳定仪器。 2.6 打开“LCQ tune”界面，对质谱仪各项参数进行设定。 （1 ）离子源的选择： 根据被分析样品的化学性质、分子量等选择不同的离子源。本机配 置有 ESI 源（电喷雾离子源）和 APCI 源（大气压下化学电离离子源）。绝大多数的样品选 用 ESI 源分析，尤其是有益于那些热不稳定化合物、中等到高极性化合物和大分子（蛋白/ 多肽）的样品分析。分子量较小的化合物、低极性到中等极性化合物等常选用 APCI 源进行 分析。 不同的离子源，液相流速也不一样。 离子源 流速范围 最佳流速 说明 ESI 1ul/min-1ml/min 200ul/min 一般来说，高流速需要高的毛细管温度和气 体流速。 APCI 200 ul/min-2ml/min 500ul/min 一般来说，高流速需要高的鞘气和辅助气流 量，但不需要提高毛细管温度。 对于ESI 源，各项参数设定如下： 液体流速(ul/min) 金属毛细管(℃) 鞘气压力(arb) 辅助气压力(arb) 喷雾电压 (kv) 5.0 240 5 0 +3.5(-3.0**) 200 350 35 5 +4.0 (-3.5**) 1000 400 75 20 +4.5(-4.0**) 当