hplc法在烤烟酚类物质含量测定研究中的应用 - yzxzcom.doc

HPLC法测定烤烟酚类物质含量研究 张秋芳1，史怀1，唐莉娜2，刘奕平3，刘波1* （1福建省农业科学院生物技术研究所；2福建省烟草公司；3福建省中烟工业公司） 摘要：酚类物质是影响烟草生长发育及其采后制品品质的重要物质之一。文章对如何采用HPLC法测定烤烟主要酚类物质的含量进行研究, 建立了烤烟主要酚类物质含量HPLC测定方法：采用Hypersil ODS C18反相柱，检测波长338nm、流速0.8ml/min、流动相为水+甲醇+冰乙酸梯度洗脱；用超声波提取烟叶酚类物质：提取剂甲醇:水为5:5、时间30min、温度35-45℃、提取1次为最佳提取条件组合；各主要酚类物质标准品标准曲线的相关系数皆达到0.999以上。初步研究表明，不同品种烟叶主要酚类物质的相对含量不同，叶肉中主要酚类物质含量远高于叶脉。 关键词：高效液相色谱（HPLC）法；烤烟；酚类物质；测定；方法 中图分类号： 文献标识码： Study on the polyphenols of tobacco by HPLC ZHANG Qiu-fang1,SHI Huai1,TANG Li-na2,XIE Xiao-dan2,LIN Pei-zhang2,LIU Yi-ping3, LIU Bo 1* (1 Biotechnology Institute，Fujian Academy of Agricultural Sciences，Fuzhou，Fujian 350003，China; 2 Fujian Tobacco Company，Fuzhou，Fujian 350003，China; 3 Fujian Tobacco Industry Company，Xiamen，Fujian 361000，China) Abstract: Polyphenols are important substance which affect the growth of the tobacco and their product quality. An HPLC method to determine the polyphenols of tobacco was established with a Hypersil ODS C18 raphase column.HPLC suitable condition was 338nm as measuring wavelength,0.8ml/min as velocity of flow,water,methanol and acetic acid as mobile phase with gradient mode.Ultrasonic extraction method with fifty percent methanol liquor as extractant and from 35℃ to 45℃ for 30min once is the best combination of extraction method.The correlation coefficient of each phenol standard is higher than 0.999.The fingerprints of polyphenols of tobacco are different with varieties of tobacco. The content of polyphenols of tobacco in chloroplast tissure is much more higher than its in vein. Key Words: High Performance Liquid Chromatography (HPLC);Flue-cured tobacco； Polyphenols，analys 酚类物质在烟草生长发育、调制特性、烟叶色泽、烟气香吃味和烟气生理强度等方面都起着重要作用[1-2]，是影响烤烟生长发育及其采后制品品质的重要物质之一 ，也是研究和衡量烟草品质不可忽视的一个重要因素。近年来，对烟草酚类物质的研究越来越引起人们的重视。已有的研究表明，多酚类物质的含量与烟叶等级是相一致的：高等级烟叶中的多酚含量高[3]，等级较好的烟叶中其主要酚类物质绿原酸和芸香苷的含量也较高[4]，低等级烟叶多酚含量低[3]。本研究拟通过对烟草酚类物质提取条件的优化与分析比较，了解烤烟烟叶中主要酚类物质的分布规律和不同品种烤烟的酚类物质在HPLC图谱上的差异，建立烤烟主要酚类物质含量HPLC测定方法，为进一步研究酚类物质的形成与调控机理提供参考。 1材料与方法 1.1主要仪器与试剂