成人破骨细胞的体外培养.pdf

中西医 结合 学报 2 0 03 年 5 月 第 1 卷 第 1 期 J C hin In t egr M ed , M ay 2 0 03 , V ol .1, N o .1 ·57 · ·技术与方法 · 成 人 破 骨 细 胞 的体 外 培 养 欧阳桂林 , 杨庆铭 , 邓廉 夫, 许福萍, 朱雅萍 ( 上海第二医科大学附属瑞金医院骨科 , 上海市伤骨科研究所, 上海 20002 5) [摘要 ] 目的 建立成人破骨细胞体外培养的方法 , 观 察成骨细胞对破骨细胞分化、增殖和功 能的影 响 , 为进一步研究补 肾 中药防治骨溶解和骨质疏松症提供基础 。材料和方法 从成人骨髓 中提 取单核细胞 , 以 1 , 2 5- ( O H )2 D3 作 为刺激 因子 , 分 3 组培养: 单核细胞与成骨细胞共 同培养 , 单核细胞单独 培养 , 单核细胞与成骨细胞条件 培养液培养 。生物显微镜下观察细胞 的分化过程 , H E 染色和抗酒石酸酸性磷酸酶( T rap ) 染色方法作组织化学观察 , 扫描 电镜( SEM ) 观 察骨吸收功能。结果 在 单核细胞与成骨细胞共 同培养组 , 可见单核细胞逐步融合成多核细胞 ; H E 染色和 T rap 染色可 见阳性 多核细胞 ; 扫描 电镜观 察可见骨片上有骨吸收陷窝形成。其他两组则未得到上述结果。结论 成人骨髓 单核细胞在一 定培养条件 下能分化成 熟为 具有典型的破骨细胞表型的多核细胞 : T r ap 染色阳性 , 具有骨吸收功能。与成骨细胞的直接接 触是破 骨细胞 分化、增殖和 发 挥功能的必不可少的条件 。 [关键词] 细胞培养 ;破骨细胞 ; 成骨细胞 ; 骨溶解 [ 中图分类号] R494 .2 6 [文献标识码 ] A [文章编号] 1672 -1977 ( 2003) 01-00 57-05 Culture of human osteoclasts O UY AN G Gui-Lin , YA N G Qin g-Min g , D EN G Lian-F u , XU Fu -P in g , Z H U Y a-P in g ( Depar tm en t o f O rt h opaedic s , Ruij i n H ospit al , Sh an gh ai Secon d M edical U niver sit y ; Shan ghai In st it ut e of Tr aum atology an d Or t hopeadics , Sh an ghai 2 0002 5 , Chin a) [ABSTRACT ] Obj ective T o est abli sh a st able , u sefu l cu ltu r e sy st em for hum an ost eocla st s an d to inve s- t igat e t he effect o f ost eoblast s on t he differ en tiat ion , p r oliferat ion an d act ivat ion o f ost eocla st s so a s to p r o- vide a ba se for t h e st u die s on p r even t ion an d tr eatm en t o f ost eoly si s an d ost eop or osi s . Methods In t he pr esen ce o f 1, 2 5- ( O H )2 D3 , m on ocy t es ab st r act ed from hum an bone mar row w er e cult u red in t h r ee gr oup s : co-cu