不同浓度白消安对树鼩精子发生过程影响.pdfVIP

摘要 |IIIII I I I]l l UlIIIIII II 摘要 Y2579602 树晌是新兴的实验动物，在进化地位及生理生化特征上较啮齿类更加接近 于灵长类。而且树晌有很多优点，例如它的繁殖周期短，生长发育周期快，相对 于大型灵长类动物其使用价格便宜。这些特征使树昀在生物医学研究中较非人灵 长类模型动物猕猴有更高的实用性和更大的发展潜力。现代生物医学研究中，转 基因技术是建立疾病动物模型的重要和常用手段。目前还没有关于转基因树嗣的 研究报道，而建立树嗣基因操作平台对于推动树鼬在生物医学研究中的广泛应用 具有决定意义。建立转基因动物模型的方法有多种，而此项研究主要是针对精原 干细胞移植这一方面入手。利用精原干细胞移植方法建立转基因动物，首先要清 除移植受体自身的生殖细胞(包括精原干细胞及分化的生殖细胞)，然后再将供 体精原干细胞移植到生精作用受损的受体睾丸曲细精管中，曲细精管内环境可以 有效地刺激移植精原干细胞增殖、分化产生转基因精子。雄性生殖细胞的发生和 发育受年龄和激素调控，青春期前完整的生精过程尚未发生，睾丸曲细精管的主 要细胞构成为支持细胞，精原干细胞，以及由精原干细胞通过有丝分裂形成的精 母细胞。青春期到来后，曲细精管即开始连续的生精过程，产生很多分化成熟的 细胞。有几种方法可以消除精原干细胞移植时受体的内源性精子发生，在有关哺 乳动物的实验中，一般采用化学处理的方法，即白消安这种烷化剂处理。。白消 安又称马利兰，属氮芥类烷化剂，化学名为l，4一丁二醇二甲磺酸酯，是甲基磺酸酯 类的代表药物。它也是慢性粒细胞白血病的传统化疗药物以及造血干细胞移植预 处理中最常用的药物。但随着该药物的广泛使用，发现长期服用该药物的男性出 现不育现象。白消安能特异杀伤精原干细胞，但对于内环境中的支持细胞损伤较 小，内环境的稳定有助于精原干细胞的恢复，可以用于制作精原干细胞移植受体。 在小鼠中，使用白消安制备精原干细胞移植受体已是非常成熟的技术，也有人使 用白消安制各精原干细胞移植用的受体大鼠及猕猴。不同物种中白消安的使用剂 量有很大差异，对于小鼠来说需要注射大约30mg／kg才能有效去除内源精原干 细胞，大鼠中的剂量约为15 mg／kg就可使精子发生细 mg／kg，而猕猴注射8—12 胞产生不可恢复的损伤。目前树铜没有关于这个方面的研究进展，而这篇文章主 不同浓度的白消安对树嗣精子发生过程的影响 要研究目的，根据白消安对树购睾丸生精功能影响的剂量．时间．效应关系．探讨白 消安用于制备雄树嗣长期不育模型和精原干细胞移植受体模型的最佳剂量。通过 实验结果，发现白消安的使用剂量越高，破坏精子生成需要的时间就越短，生精 作用恢复需要的时间也越长，甚至有的可能无法恢复。但白消安的剂量效应在个 体间有较大差异，这可能与树嗣年龄相关。在我4i]N试的7组剂量中，35mg／kg 剂量组应该是制备树嗣精原干细胞移植受体的最佳选择，既可以有效清除内源性 生精细胞，也使生精过程不易恢复甚至不能恢复，同时也不会导致树嗣死亡。而 其他的剂量，如15mg／kg至30mg／kg剂量组，虽然也能对精原干细胞造成损伤， 但是经过一段时间之后受损的精原干细胞可以恢复并启动内源的精子发生过程， 而40mg／kg和45mg／kg剂量组，由于对树鼠句本身的毒害作用太大从而导致树嗣的 死亡。 关键词：树嗣，精原干细胞，精子发生，白消安 II 摘要 Abstract Asan shrewsarecloserto on animal，tree emergingexperimental