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猪血红蛋白的提取及修饰的初步研究
⑧ 塑坚鲞兰堡主兰堡堡塞
摘 要
从新鲜猪血．出发，经过超速离心，微孔滤膜过滤等步骤分离纯化得到无基
质猪血红蛋白。猪血红蛋白纯化的产物经SDS一队GE方法分析显示只有一条
条带．证明了无基质血红蛋白容易发生四聚体的解聚现象，测定了无基质猪血
红蛋白的半饱和氧分压(P。)和希尔系数(n)等有关猪血红蛋白(pHb)携
氧能力的参数，并考察了别构效应调节剂对pHb携氧能力的影响。
修饰。与天然血红蛋白相比，DBBF修饰后的血红蛋白具有抗解聚的特性，经
SDS—PAGE分析发现DBBF修饰产生的衍生物存在血红蛋白亚基之间的交
联。比较了修饰时pHb所处的空间构象(脱氧状态的T构象和氧合状态的R
构象)、修饰剂的用量、修饰时间等条件对DBBF修饰pHb的影响，并且DBBF
对pHb的修饰还受到别构效应调节剂的影响。
lPEG大分了．化pHb是延长其在循环系统中的停留时间、降低免疫原性、
减少肾脏毒性的有效办法，而PEG修饰一般都使pHb携氧能力下降。我们比
较了4种不同方法活化的PEG衍生物对pHb修饰产物携氧能力的影响，还研
究了修饰时pHb所处构象对修饰的影响，又用PEG修饰用DBBF内交联的
pHb．考察了PEG用量，修饰时间，修饰温度。修饰缓冲液pH值等不同条件
对修饰衍生物的携氧能力的影响。在有别构效应调节剂存在的条件下，用DBBF
内交联处于脱氧状态的pHb(T态)，再用PEG修饰，可以得到携氧能力好，
分子量适宜，四聚体稳定的修饰产物。l／，一
、‘一 、
关键词： 血红蛋白 修饰聚乙三醇耀每南—-≤高囱￡I豺骏)延胡索酸酯
⑧ 塑坚查兰堕主堂垡堡壅
Abstract
from blood
SWoma-free is and fresh
porcine separatedpurified pig
hemoglobin
andfiltrationwitllO．45 to films．SDS—PAGE
by Bm 0．22ttm analysis
centrifugation
of shows oneband．Itis thatthe
only proved
porcinehemoglobin
purified
of fromtetramertodimeristaken have
dissociation place．We
porcine
hemoglobin
tothe stromafree
determinedthe half-saturationof
oxygenpressurecorresponding
theHill also the
coefficient(n)，and dependence
hemoglobin(P50)and
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