缺氧诱导因子-1α表达与移植静脉再内皮化关系的研究.pdfVIP

中文摘要 目 的 随着静脉移植在治疗冠心病和周围动脉缺血性疾病中的广泛 应用，内膜增殖所引起的移植静脉狭窄成为影响术后远期效果的 主要因素。据统计，静脉移植术后早期(移植后30天内)静脉阻 塞率达5—26％；在晚期(移植后2年以上)，动脉重建后的5年 累积阻塞率高达40％。这主要是由于血管内膜增生(IH)及粥样 硬化导致的再狭窄所致，严重影响了远期疗效。内膜增生的发生 机制尚不明确，但大量文献揭示，损伤、缺血、血小板衍生促生长 因子、动脉血液动力学及移植静脉与动脉的顺应性差异等多种因 素，均和内膜增生的发生、发展有关。目前认为：血管内皮细胞 (VEC)结构与功能的完整性在维持血管正常结构与生物学功能 及移植血管重塑过程中起着重要作用。静脉移植术中机械性损伤 及慢性缺血缺氧等因素均可导致VEC受损，引起术后移植静脉 IH、血管再狭窄。早期恢复VEC结构及其生物学功能，即再内皮 化，已成为防治移植静脉IH的重要途径之一。如何抑制移植静脉 内膜增生是血管外科亟待解决的重大课题之一。深入研究移植血 管再内皮化相关基因，将为其在基因治疗方面提供重要的实验依 据。乒 ／ 缺氧诱导因子一1q(HIF—la)是近年来备受重视的与血管 形成和生长有关的转录因子，其调控着与内皮细胞分裂和增殖密 切相关的血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达。因此，本实验 通过观察移植静脉中HIF—l俚与VEGF表达水平及其二者关系， 探讨HIF—ld表达水平与移植静脉再内皮化的关系。 方 法 本试验采用间置移植Wistar大鼠颈内静脉于同侧颈总动脉 动物模型。60只Wistar大鼠(中国医科大学实验动物部提供)， 雌雄不拘，体重(250±40)g／只，3个月龄。随机分为3组，模型2 个组和对照组，每组20只。前者行自体右颈内静脉移植到同侧颈 总动脉术。后者不施加任何干预。术后7d与14d切取移植静脉。 所取标本用10％中性甲醛固定或液氮速冻后置于一70℃深冻冰 箱中保存。分别用蛋白印迹法(Western blotting)、免疫组织化学 及电镜等检测或观察HIF—let和VEGF表达水平及再内皮化过 程。 结 果 在本实验中，我们通过大鼠移植静脉模型观察到，实验组中 阳性表达细胞均较对照组显著(P均0．05)。在术后7d，损伤静 脉内皮开始自身修复，出现部分内皮化，即再内皮化过程，HIF一 1口蛋白与VEGF蛋白表达较为显著。术后14d时，再内皮化进程 在蛋白水平的表达与VEGF表达和VEC再内皮化的变化均表现 出一种平行趋势。术后7d与14d相比较：移植静脉再内皮化显 著；HIF—l o【和VEGF蛋白表达增强(P均0．01)；增生内膜中 =O．9026，Po．01)。1‘ 了_ ·2· 结 论 在移植静脉重塑早期，HIF—la通过对YqEGF的调控参与并 促进了VEC的增殖和受损内皮再内皮化的进程。移植静脉得以 较长时间不出现栓塞和狭窄可能与损伤血管内皮再内皮化相关基 凋亡来实现的。因此，我们认为HIF—la在损伤性VEC自身修复 过程中起着重要作用，与移植静脉再内皮化过程密切相关；I：IIF— l仅在移植静脉重塑早期表达不足是引起移植静脉IH的重要基因 之一。 关键词：移植3静脑钛缺氧诱导因子一la；血管内皮生长因子； 血管内皮细胞 ·3· The between induciblefactor一1 and hypoxia ctexpression relationship after vein novoendotheli