新型脱细胞脑组织修复支架的制备及其细胞相容性.pdfVIP

第33卷 第 1期 中山大学学报(医学科学版) Vol|33 No．1 2012年 1月 JOURNALOFSUNYATSENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jan． 2012 · 技术研究 · 新型脱细胞脑组织修复支架的制备及其细胞相容性 何海勇，李文胜 ，王 辉，蔡梅钦，龚 瑾 ，郭 英 (中山大学附属第三医院神经外科 ，广东 广州 510630) 摘 要：【目的】研制天然脱细胞脑组织修复支架，并对其形态结构、主要成分和细胞相容性进行分析，为研制出理想的 脑损伤修复支架提供初步的实验依据。 【方法】取成年 sD大鼠脑皮质，运用冻融、TritonX．100、脱氧胆酸钠、DNA／RNA酶等 进行脱细胞处理并予京尼平(GP)交联，对处理后的支架材料进行形态结构观察、主要成分分析和细胞相容性观察。 【结果】 经脱细胞处理后 ，脑组织细胞成分已去除，形态上具有高度仿生的三维立体空间网状结构。经GP交联后脱细胞支架空间网 状结构变得更为明显，无菌保留3个月未见明显降解。平均孔径 (14．94-2．5)m，孔隙率达 (90．4．4-2．2)％。脱细胞支架细胞外 基质成分层粘连蛋白(LN)强阳性表达、纤维粘连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原 (ColⅣ)弱阳性表达。神经干细胞与脱细胞支架共培 养，HE可见细胞外基质支架间大量细胞粘附：SEM下可见大量神经干细胞粘附在支架材料表面 ，部分细胞表面有突起。 结【论】初步研制的脱细胞脑组织支架呈立体空间网状结构，部分保留了细胞外基质成分，并具有 良好的细胞相容性。 关键词：脱细胞脑组织；支架：交联 中图分类号 ：R651．1+5 文献标志码 ：A 文章编号：1672．3554(2012)01一O111-05 PreparationandCytocompatibilityofAcellularRatBrainM atrixforTissueEngineering Scaffolds HEHai—yong，LIWen-sheng，WANGHui，CAIMei-qin，GONGJin，GUOYing (DepartmentofNeurosurgery，ThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510630，China) Abstract：【Objective】Topreparetheacellularratbrainmatrixscaffoldanddetectitscytocompatibilitywithneuralstemcells． M【ethods】Afteranesthesiawith10％chloralhydrate，SpragueDawleyrats’brainwasremoved，andthencerebralcortexwasisolated． Beingmadeuseoffreeze—thaw ，TritonX一100，sodium deoxycholate，DNA enzyme，andRNA enzyme，theacellularscaffoldofrat braintissuewasprepared， andafterbeingcross—linkedwithGenipin， aninitialacellularratbrainmatrixscaffoldwasmade．Then， HaematoxylinandEosinstaining(HE)wasusedtoevaluateitscontent．Scanningelextronmicroscopy(SEM)wasusedtoviewthe uhrastructureofthesamplesandmeasuretheporesizeofspecimens． Immunohistochemicalanalysisofacellularscaffoldwascarried outtoseekthedistributionandcont