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低温处理对不同品种水稻苗期保护酶活性影响摘要:低温冷害对农作物的危害是多方面的。在寒冷地区选择耐低温伤害的品种,对于生产实践有重要意义。从SOD、POD含量的变化可以说明植株本身在冷害条件下植物体内的保护体系发生了一系列的应激反应,使植物在冷害温度下得以适应。 关键词:水稻;低温处理;酶活性 中图分类号:S162.5+3 文献标识码:A 文章编码:1674-0432(2010)-07-0089-1 0 前言 低温对水稻幼苗生长发育有明显伤害,在寒冷地区选择耐低温伤害的品种,对于生产实践有重要意义。本文主要讨论0℃以上低温对水稻幼苗造成的生理障碍,研究冷胁迫下水稻幼苗体内酶促防御系统的两个重要保护性酶SOD、POD的变化,以期为水稻耐冷性研究提供依据。 1 材料与方法 1.1 水稻幼苗的培养与冷害处理 水稻品种松粳、吉玉粳、长白10号、沈农265和黑引02-1由吉林农业大学水稻研究所提供。28℃催芽,然后25℃培养,当苗长到一定时期后(大约培养12天),将其放到4℃和8℃温度下培养40小时,然后取样。 1.2 过氧化物酶POD活性的测定 取水稻叶片0.5g加液氮,磷酸缓冲液于预冷的研钵中研磨成匀浆,离心,上清液转入容量瓶中,定容至刻度,贮于低温下备用。取光径为1cm的玻璃比色杯2只,一只加入反应混合液3ml和磷酸缓冲液1ml,作为对照,另一支中加入反应混和液3ml和上述酶液1(如酶活性较高可稀释之),立即开启秒表纪录时间,于分光光度计上测量470nm波长下吸光度值,每隔1min读数1次。以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小,即以每分钟A470的化变值0.01为一个相对酶活单位,计算植物组织内过氧化物酶酶活力的大小。 POD活性[u/(g.min)]= (△A470×VT)/(W×Vs×0.01×t) 1.3 超氧化物歧化酶SOD活力的测定 应用氮蓝四唑法测定。取水稻叶片0.5g加液氮,磷酸缓冲液于预冷的研钵中研磨成匀浆,离心,上清液为SOD粗提液。加反应混合液照光显色10min。给1支试管罩上比试管稍长的双层黑色硬纸套遮光为对照。以遮光的对照管作为对照,分别在560nm下测定各管的OD值,计算SOD活性。SOD活性单位以NBT光化还原的50?为一个酶活性单位表示。 SOD总活性[u/g(FW)]=(ACK-AE)×VT/0.5×ACK×W×V1 2 结果与分析 2.1 低温处理对不同品种水稻苗期叶片过氧化物酶活性的影响 通过设置0℃以上低温4℃和8℃对5个水稻品种进行了处理,处理后水稻苗期叶片过氧化物酶(POD)的变化如图1所示,大多品种POD随温度的降低而升高。但沈农265在4℃时的值要低于8℃。而吉玉粳则两处理变化不明显。 2.2 低温处理对不同品种水稻苗期叶片超氧化物歧化酶活性的影响 低温处理对不同品种水稻苗期叶片超氧化物歧化酶活性的影响见图2,所有5个品种超氧化物歧化酶(SOD)随温度改变的变化规律基本一致。随温度的降低,SOD活性都有所增加,但不同品种变化稍有不同。吉玉粳和黑引02-1两品种在4℃和8℃时,虽也表现为增加的趋势,但变化不明显。而松粳则在8℃处理时与对照的差异不明显,相反在4℃处理时SOD的值要明显高于8℃处理。 图1 低温处理水稻苗期叶片过氧化物酶活性的变化 图2 低温处理对不同品种水稻苗期叶片超氧化物歧化酶活性的影响 3 小结 4℃和8℃低温处理后,水稻苗期过氧化物酶的变化多数为随温度的降低而POD升高,但沈农265在4℃时的值要低于8℃。 所有5个品种超氧化物歧化酶(SOD)随温度改变的变化规律基本一致。随温度的降低,SOD活性都有所增加。 本实验的结果表明,在低温胁迫时,过氧化物酶和超氧化物歧化酶在不同的水稻品种中多数表现为,随温度的降低保护酶活性增加的趋势。总之,植物抗寒机制较复杂,仅从某一个层面去研究植物的抗寒性或抗寒性中的某个环节是远远不够的。 参考文献 [1] 王晨光,王希,苍晶,等.低温胁迫对水稻幼苗抗冷性的影响[J].东北农业大学学报,2004,35(2). [2] 冯昌军,罗新义,沙伟,等. 低温胁迫对苜蓿品种幼苗SOD、POD活性和脯氨酸含量的影响[J].草业科学,2005,22(6). [3] 李建设,耿广东,程智慧.低温胁迫对茄子幼苗抗寒性生理生化指标的影响[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2003,31(1). 作者简介:祝涛(1982-),男,吉林长春人,吉林农业大学生命科学学院助理实验师,研究方向:生物化学与分子生物学;杨美英(1974-),女,蒙古族,吉林长春人,吉林农业大学生命科学学院