陈焕程动物细胞培养和核移植技术.pptVIP

4、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 5、如何理解原代培养和传代培养？ 6、传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 7、有些为何能一直传下去？ 8、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能 发生突变，朝着癌细胞方向发展 不全是 9、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞，因为10－50部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ P46讨 论 充足营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等合成成分及血清、血浆等天然成分。） 适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境 1、无菌、无毒的环境 (二)动物细胞培养的条件 培养液和培养器具无菌处理 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 （二）动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 补充合成培养基中缺乏的物质 葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等 思考：动物细胞培养基较植物组培培养基有何独特之处？ 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别：培养基的不同 (二)动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 （二）动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： O2：呼吸作用 CO2：维持培养液的PH值 （95%空气和5% CO2 ） 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 1、动物细胞培养基较植物组培培养基有何独特之处？ 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 防止细胞间接触抑制现象，使细胞与培养液更充分接触 3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，而不能发育成个体 4、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 动物细胞培养 植物组织培养 植物细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体或组织 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究 （三）动物细胞培养的应用 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞（　） A．细胞系 B．细胞株 C．原代细胞 D．传代细胞 2、动物细胞工程技术的基础是 ----- （　 ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体　 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于----（ ） A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。 A 教学反馈 复习：动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 配置细胞悬液 剪碎用胰蛋白酶处理 10代细胞 转入培养瓶 10-50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液稀释 传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。 传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变） 分瓶传代培养 原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制 继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。 原代培养 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： O2：呼吸作用 CO2：维持培养液的P